[发明专利]苏金单抗制品中半胱氨酸化变异体的去除方法

摘要

本发明提供一种利用阴离子交换层析去除苏金单抗制品中半胱氨酸化异构体的方法，该方法包括使所述苏金单抗制品经受阴离子交换层析，其中所述苏金单抗制品包含哺乳动物细胞重组产生的苏金单抗。本发明的方法可以有效去除半胱氨酸化异构体，并且工艺简单稳定，重复性好，并且不会破坏抗体的正常结构；与现有技术产品相比，苏金单抗的质量也得到提高。

主权项

1.一种用于去除苏金单抗制品中半胱氨酸化变异体的方法，所述方法包括，使所述苏金单抗制品经受阴离子交换层析，其中，所述苏金单抗制品包含哺乳动物细胞重组产生的苏金单抗，所述方法包括：1) 以复合型阴离子交换层析填料装柱，使用5‑50 mM Tris‑HCl缓冲液，pH 8.9平衡层析柱至基线平，其中所述复合型阴离子交换层析填料为Capto^TM adhere ImpRes填料或Bestarose Diamond MMA填料；2) 将含所述苏金单抗的上样液调pH值至8.5±0.1，上样，使用5‑50 mM Tris‑HCl缓冲液，pH 8.9平衡所述层析柱至基线平，所述上样液为重组产生苏金单抗的哺乳动物细胞的培养上清液，或者为所述培养上清液的经纯化部分；3) 以流动相A和流动相B进行线性梯度洗脱，其中流动相A为5‑50 mM Tris‑HCl缓冲液，pH 8.9，流动相B为10‑100 mM Tris‑HCl缓冲液，pH 7.1，线性梯度洗脱包括：70‑0%的流动相A和30%‑100%的流动相B洗脱至少20个柱体积（CV），其中100%的流动相B洗脱至少8个CV，通过监测A280处的吸光度在蛋白出峰后收集洗脱级分；并且，分别控制步骤2)中所述上样液和步骤3)中所述流动相的流速，使得第一个洗脱峰的保留时间大于3分钟。