[发明专利]一种TaqMan-MGB探针技术检测影响降压药物疗效基因的方法学建立

摘要

本发明公开了一种TaqMan‑MGB探针实时荧光定量PCR技术联合检测影响降压药物疗效基因的方法，检测待测样本中影响降压药物疗效基因的多态性，本发明同够时检测五个SNP位点，使用的引物和TaqMan‑MGB探针特异性强，可降低PCR产物污染引起假阳性的风险操，操作简单、结果准确可靠，本发明通过检测NEDD4L‑326G＞A(rs4149601)、AGTR1 1186A＞C(rs5186)、ACE I/D(rs1799752)、ADRB1 1165G＞C(rs1801253)和CYP3A5*3(rs776746)这些有功能意义的突变可辅助临床医生选择合适的药物和剂量，或者避免药物相互作用的发生，使病人得到最佳的治疗效果，从而达到真正“用药个体化”的目的。

主权项

1.一种检测影响降压药物疗效基因突变用的引物、TaqMan/MGB探针，其特征在于，引物探针的序列如下：1)用于NEDD4L基因G326A SNP位点检测的引物和TaqMan/MGB探针：上游引物：5’‑AGAACTTGCTCTGCCCTT‑3’，下游引物：5’‑ATGTGGAGAGCTTCAGAAT‑3’，野生探针：5’‑FAM‑CGAGTGTTACCTG‑MGB‑3’，突变探针：5’‑HEX‑CGAGTGTTACTTGC‑MGB‑3’；2)用于AGTR1基因A86C SNP位点检测的引物和TaqMan/MGB探针：上游引物：5’‑GAAGGAGCAAGAGAAC‑3’，下游引物：5’‑GTCGGTTCAGTCCACAT‑3’，野生探针：5’‑FAM‑AAATGAGCATTAG‑MGB‑3’，突变探针：5’‑HEX‑AAATGAGCCTTAG‑MGB‑3’；3)用于ACE基因In/del SNP位点检测的引物和TaqMan/MGB探针：上游引物：5’‑AGCCACTCCCATCCTTTCTC‑3’，下游引物：5’‑CCCTTAGCTCACCTCTGC‑3’，野生探针：5’‑FAM‑ATAAAAGTGACTGTATCACG‑MGB‑3’，突变探针：5’‑HEX‑ATAAAAGTGACTGTATAGG‑MGB‑3’；4)用于ADRB1基因G1165C SNP位点检测的引物和TaqMan/MGB探针：上游引物：5’‑CTTCAACCCCATCATCTAC‑3’，下游引物：5’‑GTCTCCGTGGGTCGC‑3’，野生探针：5’‑FAM‑CAGAGCAGTCCCT‑MGB‑3’，突变探针：5’‑HEX‑CAGAGCAGTCGCT‑MGB‑3’；5)用于CYP3A5基因*1/*3SNP位点检测的引物和TaqMan/MGB探针：上游引物：5’‑ACTGTCATTTCTAACCATAATC‑3’，下游引物：5’‑ACAGCAAGAGTCTCACAC‑3’，野生探针：5’‑FAM‑TTTGTCTTTCAATAT‑MGB‑3’，突变探针：5’‑HEX‑TTTTGTCTTTCAGTAT‑MGB‑3’。