[发明专利]一种分析重组人胰岛素及其类似物或偶联物与胰岛素受体结合率的方法有效
| 申请号： | 201910036918.4 | 申请日： | 2019-01-15 |
| 公开（公告）号： | CN109682963B | 公开（公告）日： | 2021-09-21 |
| 发明（设计）人： | 何跃;杨黎;曹宇;刘日勇;范开 | 申请（专利权）人： | 重庆派金生物科技有限公司 |
| 主分类号： | G01N33/543 | 分类号： | G01N33/543 |
| 代理公司： | 重庆中之信知识产权代理事务所(普通合伙) 50213 | 代理人： | 罗庆 |
| 地址： | 400700 *** | 国省代码： | 重庆;50 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种分析人胰岛素及其类似物或偶联物与胰岛素受体结合率的方法，首先胰岛素受体转染到HEK‑293细胞上；人胰岛素受体的抗体包被在酶标板上，胰岛素受体抗体结合胰岛素受体，人胰岛素及类似物或偶联物和生物素标记胰岛素竞争结合胰岛素受体，亲和素结合生物素，通过HRP显色测定受体结合率。本发明利用抗原抗体结合、配体受体结合、生物素能结合亲和素的原理可准确地测定胰岛素受体结合率变化，本发明已具有生物制品受体结合实验测定方法的操作步骤简便、无污染、低成本、准确性高等要求。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 分析 重组 胰岛素 及其 类似物 偶联物 受体 结合 方法 | ||
【主权项】：
1.一种分析重组人胰岛素及其类似物或偶联物与胰岛素受体结合率的方法，其特征在于：包含如下步骤：S1：制备重组人胰岛素受体细胞；S2：向步骤S1的重组人胰岛素受体细胞中加入细胞裂解液进行裂解，收集胰岛素受体；S3：用酶联免疫方法结合步骤S2所收集的裂解液中的胰岛素受体；S4：制定不同浓度的重组人胰岛素及其类似物或重组人胰岛素偶联物作为待测样品，制定不同浓度的重组人胰岛素标准品作为对照品；将步骤S3所得结果分为两份，分别加入待测样品、标准品，再加入一定浓度生物素标记的胰岛素，通过生物素‑亲和素酶联免疫的竞争结合的方法测定受体结合后的待测样品、标准品的OD值；S5：根据步骤S4测得受体结合后的OD值计算出所述重组人胰岛素及其类似物或偶联物的受体结合率。
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