[发明专利]一种宿根甘蔗白叶病抗性的精准鉴定方法

摘要

本发明公开一种宿根甘蔗白叶病抗性的精准鉴定方法，包括：供试甘蔗材料处理与种植、接种液配制、切茎接种法接种、病情调查、抗病性评价。本发明方法首次创建了一套简便高效的宿根甘蔗白叶病抗性的精准鉴定方法，为抗白叶病育种提供了技术支撑；其接种方法采用切茎接种法，与自然传播相似，具备发病生境条件、发病均匀，结果客观、真实、可靠；接种方法快速简便，可操作性强、接种工效高。接种后甘蔗白叶病发病显著、灵敏度高、重演性好。

主权项

1.一种宿根甘蔗白叶病抗性的精准鉴定方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)供试甘蔗材料处理与种植：以对白叶病感病的甘蔗品种为感病对照品种、以抗白叶病的甘蔗品种为抗病对照品种；将感病对照品种、抗病对照品种以及待鉴定的甘蔗材料分别切成带1‑2个芽的甘蔗茎段，分别在流动自来水中浸泡48h之后，分别用50℃±0.5℃热水处理2h，再分别用杀虫杀菌混合液浸泡10min，然后将处理后的感病对照品种甘蔗茎段、抗病对照品种甘蔗茎段以及待鉴定的甘蔗材料甘蔗茎段分别种植在盛有基质的塑料桶内，置于20℃～30℃防虫温室中培养，每份对照品种及待鉴定的甘蔗材料3～4次重复；(2)接种液配制：切取感染了甘蔗白叶病植原体的甘蔗蔗茎，通过压榨得到携带甘蔗白叶病植原体蔗汁，加入为携带甘蔗白叶病植原体蔗汁体积10倍量无菌水稀释混匀，用双层纱布过滤，滤液即为甘蔗白叶病植原体病原接种液，现配现用；(3)切茎接种法接种：待步骤(1)中所种植的待鉴定的甘蔗材料6个月以上株龄时，在阴天的傍晚用灭菌锋利切刀或灭菌枝剪将种植在塑料桶内的待鉴定的甘蔗材料、感病对照品种、抗病对照品种在基质表面上的植株切去，切取每桶内的甘蔗植株时均用灭菌后未使用的锋利切刀或枝剪，然后对感病对照品种、抗病对照品种及待鉴定的甘蔗材料进行接种，接种方式是用移液枪将100μL步骤(2)中所述甘蔗白叶病植原体病原接种液滴入一株蔗株根部切口上，每份感病对照品种、抗病对照品种及待鉴定的甘蔗材料接种30株，接种后继续置于20℃～30℃防虫温室中培养观察，且接种后先用黑色塑料薄膜将接种后的感病对照品种、抗病对照品种及待鉴定的甘蔗材料遮光24h，然后揭开黑色塑料薄膜；(4)病情调查：接种20d后，调查记录各供试甘蔗材料病株百分率，直至感病对照品种的病株百分率稳定为止；(5)抗病性评价：根据待鉴定的甘蔗材料发病株率按1‑5级甘蔗白叶病抗性分级评价标准进行甘蔗白叶病抗病性评价，所述1‑5级甘蔗白叶病抗性分级评价标准依次表示对甘蔗白叶病植原体高抗、抗病、中抗、感病和高感，其发病株率范围相应为0％‑3.0％、3.1％‑10.0％、10.1％‑20.0％、20.1％‑40.0％和40.1％‑100％。