[发明专利]一种用于在复杂基质中检测活性蓖麻毒素的金/量子点纳米探针及其应用有效
| 申请号： | 201910042764.X | 申请日： | 2019-01-17 |
| 公开（公告）号： | CN109852673B | 公开（公告）日： | 2019-12-03 |
| 发明（设计）人： | 孙洁芳;邵兵;张晶 | 申请（专利权）人： | 北京市疾病预防控制中心 |
| 主分类号： | C12Q1/6816 | 分类号： | C12Q1/6816 |
| 代理公司： | 11690 北京领科知识产权代理事务所(特殊普通合伙) | 代理人： | 艾变开<国际申请>=<国际公布>=<进入 |
| 地址： | 100013 *** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种用于在复杂基质中检测活性蓖麻毒素的金/量子点纳米探针及其应用。所述金/量子点纳米探针是利用脱氧核糖核苷酸单链(ssODN)修饰的金纳米微粒和量子点通过碱基配对杂交的方式形成脱氧核糖核苷酸双链，将金纳米微粒和量子点组装为核‑卫星结构的纳米探针。本发明用金/量子点纳米探针用于检测活性蓖麻毒素，检测限为7.46ng/mL，准确度高，可靠性好，而且无须大型设备和复杂操作。为进一步消除假阳性，本发明还提供了一种利用磁性微球富集复杂样品中蓖麻毒素的方法。在不需要知道具体活性蓖麻毒素浓度的情况下，本发明提供的金/量子点纳米探针通过荧光的淬灭(Quenched)和激活(Switch ON)，可以做到裸眼可视化的检测。 | ||
| 搜索关键词： | 量子点纳米探针 蓖麻毒素 检测 脱氧核糖核苷酸 金纳米微粒 复杂基质 量子点 磁性微球 大型设备 复杂操作 复杂样品 碱基配对 纳米探针 卫星结构 准确度 假阳性 可视化 淬灭 单链 富集 裸眼 双链 荧光 修饰 应用 杂交 组装 激活 | ||
【主权项】：
1.一种用于检测活性蓖麻毒素的金/量子点纳米探针，其特征在于，由含有脱氧核糖核苷酸单链的连接链P1修饰的金纳米微粒(P1-AuNPs)、含有脱氧核糖核苷酸单链的连接链P2修饰的量子点(P2-QDs)和脱氧核糖核苷酸单链P3组成，P1、P2和P3通过碱基配对杂交形成脱氧核糖核苷酸双链，将金纳米微粒和量子点连接起来，金纳米微粒为核，量子点环绕在金纳米微粒的核周围，组装为核-卫星结构；/n所述连接链P1的5’端为巯基，与金纳米微粒AuNPs表面连接得到P1改性的金纳米微粒（P1-AuNPs），3’端为脱氧核糖核苷酸序列L1；所述连接链P2的3’端为氨基，与量子点QDs连接得到P2改性的量子点(P2-QDs)，5’端为脱氧核糖核苷酸序列L2；连接链P1和P2各自通过序列L1、L2与P3两端的脱氧核糖核苷酸序列L1’和L2’配对杂交形成双链结构将AuNPs和QDs连接起来；/n所述连接链P1的结构简式为5’-SH-亚烷基-poly(dTn1)-L1-3’,所述连接链P2的结构简式为5’-L2-poly(dTn2)-亚烷基-NH2-3’，所述连接链P3的结构简式为3’-L1’-poly(dAn3)-L2’-5’，其中，亚烷基的碳原子数为4～12的整数；poly(dTn1)、poly(dTn2)是碱基为胸腺嘧啶(T)的脱氧核糖核苷酸链，n1和n2是碱基为胸腺嘧啶(T)的脱氧核糖核苷酸的数量，独立地为6～15个；poly(dAn3)是碱基为腺嘌呤(A)的脱氧核糖核苷酸序列，n3是碱基为腺嘌呤(A)的脱氧核糖核苷酸的数量，所述数量为9～21的整数；L1为6～15个脱氧核糖核苷酸的序列，其中碱基为腺嘌呤(A)的脱氧核糖核苷酸数量至少为脱氧核糖核苷酸总数的40%，碱基为胸腺嘧啶(T)的脱氧核糖核苷酸数量至少为脱氧核糖核苷酸总数的40%；L2为9～18个脱氧核糖核苷酸的序列；/n所述连接链P1一端的序列L1中，碱基为腺嘌呤(A)的脱氧核糖核苷酸和碱基为胸腺嘧啶(T)的脱氧核糖核苷酸交替排列，形成…ATATATAT…的序列；所述连接链P3一端的L1’序列和P1的L1序列配对杂交外，还与P2的L2的一部分配对杂交。/n
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