[发明专利]一种铜绿假单胞菌家兔脓胸脓絮状物生物膜模型建立方法

摘要

本发明属于生物膜技术领域，公开了一种铜绿假单胞菌家兔脓胸脓絮状物生物膜模型建立方法；制备细菌溶液；麻醉；固定；右前胸部约第4、5、6、7肋处皮肤剃毛、备皮；定位；消毒；穿刺：剪开右侧第6肋间穿刺点皮肤约1.0cm切口，直镊穿破胸膜，夹取夹头皮针管置入并固定，接上注射器，回抽直至无法抽出气体；按家兔重量2ml/kg上述菌液给予注射；将头皮针管夹紧后，剪除头端，用镊子将剩余管体送入胸腔，缝合皮肤伤口；术后解剖家兔胸腔，可发现脓胸形成，胸腔内有大量脓液，及白色脓絮状物；取少量脓絮状物，涂布于载玻片，进行肽核算荧光原位杂交检测，红色密集部分即为铜绿假单胞菌形成的生物膜。

主权项

1.一种铜绿假单胞菌家兔脓胸脓絮状物生物膜模型建立方法，其特征在于，所述的铜绿假单胞菌家兔脓胸脓絮状物生物膜模型建立方法包括以下步骤：步骤一：取铜绿假单胞菌菌株复苏，增菌，使用LB肉汤溶解，制成所需浓度的细菌溶液；步骤二：将家兔置于家兔手术盒子，耳缘静脉注射2％戊巴比妥钠将家兔麻醉；步骤三：将家兔移至手术台，取左侧卧位，捆绑固定，充分暴露右前胸壁区域；右前胸部第4、5、6、7肋处皮肤剃毛、备皮；步骤四：触摸右侧胸壁肋骨，从第12肋起始，触及第6肋间，选取胸骨‑脊柱的中外部分作为穿刺点，签字笔标记，重复定位2次；步骤五：碘伏消毒穿刺点周围皮肤，直径约10cm，2次，铺手术巾；步骤六：剪开右侧第6肋间穿刺点皮肤1.0cm切口，直镊穿破胸膜，夹取夹头皮针管置入并固定，接上注射器，回抽直至无法抽出气体；按家兔重量2ml/kg上述菌液给予注射；步骤七：将头皮针管夹紧后，剪除头端，用镊子将剩余管体送入胸腔，缝合皮肤伤口；术后解剖家兔胸腔，可发现脓胸形成，胸腔内有大量脓液，及白色脓絮状物；步骤八：取脓絮状物，涂布于载玻片，进行肽核算荧光原位杂交检测，红色密集部分即为铜绿假单胞菌形成的生物膜。