[发明专利]一种靶位点鉴定方法在审
| 申请号： | 201910051597.5 | 申请日： | 2019-01-21 |
| 公开（公告）号： | CN109680099A | 公开（公告）日： | 2019-04-26 |
| 发明（设计）人： | 韩文静;张燕军;王瑞军;苏蕊;王志英;李金泉 | 申请（专利权）人： | 内蒙古农业大学 |
| 主分类号： | C12Q1/6897 | 分类号： | C12Q1/6897;C12N15/85 |
| 代理公司： | 北京细软智谷知识产权代理有限责任公司 11471 | 代理人： | 赵芳 |
| 地址： | 010000 内蒙古自*** | 国省代码： | 内蒙古;15 |
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| 摘要： | 本发明涉及一种靶位点鉴定方法，具体为miRNA和TGF‑β‑2相互作用的靶位点鉴定方法，先对多个绒山羊样本的miRNA和mRNA进行测序；再寻找得到靶基因和miRNA，然后采用双荧光素酶报告基因系统鉴定法进行靶点位鉴定。本发明的有益效果：本发明的靶位点鉴定方法不需要对载体或目的片段的末端进行特殊处理，不需要连接反应，也不需要进行PCR扩增，操作简单，实验周期短，效率高；通过双荧光素酶试验方法进行靶位点鉴定，提高的鉴定的准确性。 | ||
| 搜索关键词： | 靶位点 双荧光素酶报告基因 连接反应 目的片段 实验周期 系统鉴定 荧光素酶 靶基因 绒山羊 靶点 测序 样本 试验 | ||
【主权项】：
1.一种靶位点鉴定方法，其特征在于，所述靶位点鉴定方法为miRNA和TGF‑β‑2相互作用的靶位点鉴定方法，所述靶位点鉴定方法包括以下步骤：(1)对多个绒山羊样本的miRNA和mRNA进行测序；(2)寻找得到靶基因和miRNA，得到的靶基因是TGFβ2‑3'UTR‑WT，得到的miRNA为chi‑miR‑199a‑5p；所述TGFβ2‑3'UTR‑WT的序列如SEQ ID NO:1所示序列；(3)软件预测TGFβ2‑3'UTR‑WT和chi‑miR‑199a‑5p序列的作用位点；(4)采用双荧光素酶报告基因系统鉴定法进行靶点位鉴定。
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