[发明专利]一种固定化大肠杆菌制备胸苷的方法有效
| 申请号： | 201910053888.8 | 申请日： | 2019-01-21 |
| 公开（公告）号： | CN109706204B | 公开（公告）日： | 2022-05-13 |
| 发明（设计）人： | 梁国斌;汪斌;贡洁;翁居轼;杨凤丽;陈舟;叶招莲;刘维桥 | 申请（专利权）人： | 江苏理工学院 |
| 主分类号： | C12P19/38 | 分类号： | C12P19/38;C12N11/084;C12N11/10;C12R1/19 |
| 代理公司： | 常州佰业腾飞专利代理事务所(普通合伙) 32231 | 代理人： | 高姗 |
| 地址： | 213001 江*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | 本发明属于生物催化领域，具体涉及一种固定化大肠杆菌制备胸苷的方法。本发明以PVA和卡拉胶为包埋基材，活性碳为添加剂，固定产磷酸化酶的大肠杆菌，得到固定化大肠杆菌；在制备胸苷的反应中，以固定化大肠杆菌为催化剂，以磷酸盐缓冲液为溶剂，2‑脱氧‑α‑D‑核糖‑1‑磷酸二环己基胺盐和胸腺嘧啶为反应底物，生产胸苷。本发明采用固定化大肠杆菌制备胸苷，较好的提高了菌体对底物的耐受性，其稳定性得到提高，使得制备胸苷的收率提高；结果表明，经提纯后，胸苷纯度可达97％以上，收率达90％以上；经过6批次反应后，固定化大肠杆菌无明显活力损失。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 固定 大肠杆菌 制备 方法 | ||
【主权项】：
1.一种固定化大肠杆菌制备胸苷的方法，其特征在于，以固定化大肠杆菌为催化剂、2‑脱氧‑α‑D‑核糖‑1‑磷酸二环己基胺盐和胸腺嘧啶为底物、磷酸盐缓冲液为溶剂，反应合成胸苷，具体步骤包括如下：(1)将2‑脱氧‑α‑D‑核糖‑1‑磷酸二环己基胺盐和胸腺嘧啶溶于磷酸盐缓冲液中，再加入固定化大肠杆菌，进行反应，然后将固定化大肠杆菌进行分离，得到反应液；(2)将所述反应液依次经过冷藏、过滤、减压蒸干和提纯，得到胸苷。
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