[发明专利]一种CAR-T细胞的制备方法在审
申请号: | 201910054298.7 | 申请日: | 2019-01-21 |
公开(公告)号: | CN109762788A | 公开(公告)日: | 2019-05-17 |
发明(设计)人: | 张青;郑骏年;丁佳戈 | 申请(专利权)人: | 徐州医科大学 |
主分类号: | C12N5/10 | 分类号: | C12N5/10;C12N15/867 |
代理公司: | 北京品源专利代理有限公司 11332 | 代理人: | 巩克栋 |
地址: | 221002 江苏省徐*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | 本发明提供了一种CAR‑T细胞的制备方法,所述方法在T淋巴细胞激活和慢病毒感染过程均添加Akt抑制剂MK2206,得到的CAR‑T细胞的CAR阳性率显著提升,记忆性细胞比例显著提升,从而延缓了终末分化,其在体内的存活情况明显改善,实现在体外检测到杀伤能力未受损的情况下,延缓分化并提升CAR表达的阳性率,CAR‑T细胞在体内的存活状态更好,治疗效果更佳,具有广阔的应用前景和巨大的市场价值。 | ||
搜索关键词: | 阳性率 制备 延缓 体内 分化 慢病毒感染 细胞 存活状态 杀伤能力 体外检测 治疗效果 记忆性 存活 受损 应用 | ||
【主权项】:
1.一种CAR‑T细胞的制备方法,其特征在于,所述方法包括如下步骤:(1)分离外周血单个核细胞,得到T淋巴细胞;(2)将步骤(1)的T淋巴细胞激活的同时加入Akt抑制剂孵育培养;(3)将包含嵌合抗原受体的慢病毒载体或慢病毒在Akt抑制剂的作用下转导或感染步骤(2)孵育培养的T淋巴细胞,得到CAR‑T细胞并进行增殖。
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