[发明专利]一种黑果枸杞花色苷单体PRG的制备方法及其应用

摘要

本发明涉及生物技术领域，具体涉及一种黑果枸杞花色苷单体PRG的制备方法及其作为降血脂药物的应用。该发明黑果枸杞花色苷单体PRG的制备方法包括：（1）样品处理；（2）大孔树脂除糖；（3）SPE柱富集；（4）反相制备柱纯化。本发明方法制得的黑果枸杞花色苷单体PRG可作为有效成分按常规方法与药学上可接受的任何载体制成降血脂药用制剂。本发明的制备方法相比于现有的制备方法分离过程简单、易于操作；且采用固相萃取SPE‑X1柱和Mergres‑C18反相制备柱结合，能将PRG进行高效富集，富集后纯度达到80%以上，很大程度上降低了后续制备纯化难度；采用本发明方法，1kg黑果枸杞中能得到约4.3g PRG，纯度大于等于92.0%。

主权项

1.一种黑果枸杞花色苷单体PRG的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：（1）样品处理：黑果枸杞干果粉碎后，首先经含有0.1%盐酸的质量浓度为80～95%的乙醇冷浸提取，然后用含有0.1%盐酸的去离子水冷浸提取，合并提取液，减压浓缩并冷冻干燥得到黑果枸杞提取物；（2）大孔树脂除糖：将步骤（1）所制得的黑果枸杞提取物用质量体积比为1：5～7的去离子水溶解后，上AB‑8大孔树脂柱，首先用去离子水洗脱除去多糖和蛋白，然后用含有0.1%盐酸的质量浓度为80～95%的乙醇洗脱，减压浓缩并冷冻干燥得到花色苷提取物；（3）SPE柱富集：将步骤（2）所制得的花色苷提取物用质量体积比为1：3～5的去离子水溶解后，用含有0.1%盐酸的质量浓度为20～40%的甲醇洗脱5个柱体积后，经含有0.1%盐酸的质量浓度为60～80%甲醇洗脱，减压浓缩并冷冻干燥得到主要含PRG单体的花色苷富集物；（4）反相制备柱纯化：将步骤（3）所制得的主要含PRG单体的花色苷富集物用质量体积比为1：3～5的去离子水溶解后，上C18柱分离柱，用10倍柱床体积，含有0.1%盐酸的质量浓度为20～45%的乙腈酸水溶液洗脱，得到含有PRG单体的洗脱液，经减压浓缩得到黑果枸杞花色苷单体PRG的天然产物标准品。