[发明专利]采用高效液相色谱法测定目标杂质校正因子的方法及应用

摘要

本发明公开了一种在杂质对照品难以获得的情况下，采用高效液相色谱法测定特定杂质校正因子的方法，具体是在主成分转化为特定杂质的反应中，通过控制反应条件如稀释溶剂、反应时间、溶液浓度等，以杂质峰面积的增加值为自变量，主成分峰面积的减少值为因变量进行线性回归分析，然后由线性方程的斜率、主成分和待测杂质的相对分子质量及转化反应的摩尔系数计算出特定杂质的校正因子。本发明在对转化反应条件进行考察和优化的基础上，成功测定了头孢地尼原料药中目标杂质的校正因子，取得了满意的结果，与传统方法相比，本发明无需杂质对照品，且结果准确，操作简单，应用范围广阔。

主权项

1.一种采用高效液相色谱法测定目标杂质校正因子的方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)定义待测化合物中主成分A转化为目标杂质B的反应如下式：xA→yB+C，其中，C表示除目标杂质B以外的其余所有副产物，x和y分别表示转化反应中主成分A和目标杂质B的摩尔反应系数；(2)以副反应程度最小为评价指标，优化确定最终转化反应条件，然后配制待测化合物的样品溶液，立即采用高效液相色谱法测定主成分A和目标杂质B的初始峰面积值(A_A0和A_B0)；任意i时刻的副反应程度按下式计算：其中，A_A0％、A_Ai％和A_C0％、A_Ci％分别表示主成分和副产物在初始0时刻和i时刻的峰面积，以面积归一化法计；(3)在优化确定的反应条件下，于若干个不同时刻采用高效液相色谱法测定待测化合物中主成分A和目标杂质B的峰面积值A_Ai和A_Bi，当转化反应进行到一定时间时，根据反应摩尔系数比存在如下等式：其中，m_A0、m_Ai和m_B0、m_Bi分别表示主成分A和目标杂质B在初始0时刻和任意i时刻的质量，M_A和M_B分别表示主成分A和目标杂质B的相对分子质量；(4)令Δm_A＝(m_A0‑m_Ai)，Δm_B＝(m_Bi‑m_B0)和ΔPeak Area_A＝(A_A0‑A_Ai)，ΔPeak Area_B＝(A_Bi‑A_B0)，根据如下所示的校正因子的对照品法计算公式：且对于上式中的ΔConc_A、ΔConc_B，在同一反应体系中，存在下式：ΔConc_A＝Δm_A×V，ΔConc_B＝Δm_A×V，其中V相同，结合(3)、(4)中各等式，以杂质峰面积的增加值(A_B0‑A_Bi)为自变量，主成分峰面积的减少值(A_A0‑A_Ai)为因变量，进行线性回归分析可得到线性方程如下：(5)由(4)中线性方程的斜率结合主成分A和目标杂质B的相对分子质量及转化反应的摩尔反应系数可进一步计算出目标杂质的校正因子F。