[发明专利]一种血浆细胞外囊泡长链RNA文库及其构建方法在审
申请号: | 201910086801.7 | 申请日: | 2019-01-29 |
公开(公告)号: | CN109763173A | 公开(公告)日: | 2019-05-17 |
发明(设计)人: | 黄胜林;何祥火;王臻;李焱;李玉琛;赵晶晶 | 申请(专利权)人: | 复旦大学附属肿瘤医院 |
主分类号: | C40B50/06 | 分类号: | C40B50/06;C40B40/06;C12Q1/6886 |
代理公司: | 上海容慧专利代理事务所(普通合伙) 31287 | 代理人: | 于晓菁 |
地址: | 200032 *** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | 本发明公开了一种细胞外囊泡长链RNA文库及其构建方法,该构建方法包括如下步骤:血浆样品分离;血浆细胞外囊泡纯化;细胞外囊泡总RNA提取以及细胞外囊泡RNA测序文库构建和测序分析。本发明的一种血浆细胞外囊泡长链RNA文库的构建方法可从1ml血浆中稳定获得超过1万个RNA靶点,包括信使RNA、长链非编码RNA和环状RNA,可用于疾病的诊断,尤其是癌症病人的筛查和诊断。 | ||
搜索关键词: | 外囊 构建 长链 血浆细胞 细胞 筛查和诊断 非编码RNA 总RNA提取 测序分析 测序文库 血浆样品 环状RNA 信使RNA 靶点 可用 血浆 癌症 诊断 疾病 | ||
【主权项】:
1.一种细胞外囊泡长链RNA文库的构建方法,其特征在于该方法包括如下步骤:(1)样品分离采用两步离心法从全血中分离血浆;(2)细胞外囊泡纯化使用膜亲和离心柱子快速分离血浆细胞外囊泡;(3)细胞外囊泡总RNA提取使用离心柱子提取细胞外囊泡中的总RNA;(4)细胞外囊泡长链RNA文库的构建和测序分析使用SMARTer技术,模板末端的转换机制技术制备得到RNA‑seq文库。
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