[发明专利]PEDV、TGEV和PoRV的三重实时RT-PCR引物组、试剂盒及方法

摘要

本发明公开了PEDV、TGEV和PoRV的三重实时RT‑PCR引物组、试剂盒及方法。本发明设计了三对特异性引物和探针，彼此之间同源性低，应用本发明的特异性引物和探针的三重Real‑Time RT‑PCR方法和试剂盒能够实现同时鉴别PEDV、TGEV和PoRV，检测最低浓度为10copies/μL数量级，具有特异性强，扩增效率高和灵敏度高的优点。

主权项

1.一种检测PEDV、TGEV和PoRV的三重Real‑Time RT‑PCR引物组，其特征在于，包括用于检测PEDV的引物对和探针，其序列为：上游引物PEDV85F：5'‑GGGTGTTTTCTGGGTTGCTA‑3'(SEQ ID NO:1)，下游引物PEDV85R：5'‑AATAATTGGCTTTTCAGACGC‑3'(SEQ ID NO:2)，探针PEDV85P：5'‑AGAAGGCGCAAAGACTGAACCCA‑3'(SEQ ID NO:3)；和，用于检测TGEV的引物对和探针，其序列为：上游引物TGEV76F：5'‑CTCACCACCTACTACCACC‑3'(SEQ ID NO:4)，下游引物TGEV76R：5'‑GAACTTATGGTTTAACCTGCACTCA‑3'(SEQ ID NO:5)，探针TGEV76P：5'‑TACCCCAATTGCAAGTCAAACTAGAT‑3'(SEQ ID NO:6)；和，用于检测PoRV的引物对和探针，其序列为：上游引物PoRV106F：5'‑AATGTCGCTGTAATTCAGG‑3'(SEQ ID NO:7)，下游引物PoRV106R：5'‑ATCTCTTCCAATTTATACGCATC‑3'(SEQ ID NO:8)，探针PoRV106P：5'‑ACTCGACATAACAGCTGACCCAAC‑3'(SEQ ID NO:9)。