[发明专利]一种检测血液、尿液中多种蘑菇毒素的方法

摘要

本发明公开了一种检测血液、尿液中多种蘑菇毒素的方法。该方法通过对实验条件的优化，首次建立了超高效液相色谱‑质谱/质谱法测定中毒患者血液和尿液中α‑鹅膏毒肽、β‑鹅膏毒肽、γ‑鹅膏毒肽、二羟鬼笔毒肽、羧基二羟基鬼笔毒肽和羧基三羟基鬼笔毒肽含量的方法。为突发公共卫生事件的处置提供科学的检测方法。

主权项

1.一种检测血液、尿液中多种蘑菇毒素的方法，其特征在于，包括如下步骤：1)样品前处理称取血液或尿液样品，并进行前处理，得待测定的样品，其中，前处理的方法包括：将血液样品离心，提取血浆，按照1mL：1‑3mL的比例加入含0.5‑1％(V/V)乙酸的乙腈溶液，涡旋震荡、离心；取上清液用氮气吹干、定容，涡混震荡、过滤，得待测定的血液样品；将尿液过滤后，得待测定的尿液样品；2)测定a制备标准使用液将α‑鹅膏毒肽、β‑鹅膏毒肽、γ‑鹅膏毒肽、二羟鬼笔毒肽、羧基二羟基鬼笔毒肽和羧基三羟基鬼笔毒肽标准品配制成标准使用液；b绘制标准曲线吸取上述标准使用液适量，用空白样品基质配成系列浓度的标准工作液，经UPLC‑MS/MS分析，以定量离子峰面积为纵坐标，浓度为横坐标绘制标准工作曲线，得到标准工作曲线回归方程；c色谱条件：色谱柱为C18色谱柱，流动相为2mmol/L的乙酸铵水溶液A和2mmol/L的乙酸铵乙腈溶液B，流速为0.3mL/min，采用梯度洗脱方式，柱温40℃，其中，梯度洗脱的程序为：d质谱条件离子源为电喷雾离子源，采用正离子模式，多离子反应监测，毛细管电压：2.9kV；离子源温度：150℃；脱溶剂气温度：500℃；脱溶剂气流量：800L/h；锥孔反吹气流量：150L/h；e定量和/或定性测定。