[发明专利]一种无标签用于基因编辑的试剂组合及其应用在审
| 申请号： | 201910101051.6 | 申请日： | 2019-01-31 |
| 公开（公告）号： | CN110129357A | 公开（公告）日： | 2019-08-16 |
| 发明（设计）人： | 朱健康;三木大介;张文心;彭方楠 | 申请（专利权）人： | 中国科学院上海生命科学研究院 |
| 主分类号： | C12N15/82 | 分类号： | C12N15/82;A01H5/00;A01H6/20 |
| 代理公司： | 上海一平知识产权代理有限公司 31266 | 代理人： | 王正君;徐迅 |
| 地址： | 200031 *** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | 本发明提供了一种无标签用于基因编辑的试剂组合，具体地，本发明提供一种无标签用于基因编辑的试剂组合，包括：(i)第一核酸构建物，或含有所述第一核酸构建物的第一载体；以及(ii)第二核酸构建物，或含有所述第二核酸构建物的第二载体。本发明通过采用特定结构的核酸构建物，首次在植物中成功实现了RNA引导的碱基定点敲入和/或替换。 | ||
| 搜索关键词： | 核酸构建物 试剂组合 标签 基因 引导的 碱基 替换 应用 成功 | ||
【主权项】：
1.一种无标签用于基因编辑的试剂组合，其特征在于，包括：(i)第一核酸构建物，或含有所述第一核酸构建物的第一载体，所述第一核酸构建物具有从5’‑3’的式I结构：P1‑Z1‑Z2 (I)其中，P1为第一启动子，所述第一启动子为组织特异性启动子；Z1为编码Cas9蛋白编码序列；Z2为终止子；并且，“‑”为键或核苷酸连接序列；和(ii)第二核酸构建物，或含有所述第二核酸构建物的第二载体，所述第二核酸构建物具有从5’‑3’的式II所示的结构：P2‑Z3‑Z4‑Z5 (II)其中，P2为第二启动子，所述第二启动子选自下组：U6、U3、7SL、或其组合；Z3为gRNA的编码序列；Z4为polyT序列；Z5为供体DNA序列；并且，“‑”为键或核苷酸连接序列。
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