[发明专利]基于pro-铂纳米单元模拟氧化酶的胰蛋白酶检测试剂盒在审
| 申请号： | 201910111834.2 | 申请日： | 2019-02-12 |
| 公开（公告）号： | CN109813666A | 公开（公告）日： | 2019-05-28 |
| 发明（设计）人： | 林丽清;林晓昀;赵成飞;吴丽娜;林新华 | 申请（专利权）人： | 福建医科大学 |
| 主分类号： | G01N21/31 | 分类号： | G01N21/31;C12Q1/37 |
| 代理公司： | 福州智理专利代理有限公司 35208 | 代理人： | 王义星 |
| 地址： | 350004 福*** | 国省代码： | 福建;35 |
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| 摘要： | 本发明公开一种基于铂纳米单元模拟氧化酶的胰蛋白酶检测试剂盒。本发明利用鱼精蛋白（protamine，pro）既作为铂纳米单元的稳定剂，又是胰蛋白酶的的水解底物。Pro‑铂纳米单元模拟氧化酶催化溶液中氧气氧化3,3',5,5'‑四甲基联苯胺显色，提供了一种快速、简便、灵敏的胰蛋白酶检测新方法。该检测新方法所用的Pro‑铂纳米单元模拟氧化酶制备简便易得，可以实现对血清中的胰蛋白酶进行可视化分析，具有操作简便、灵敏度高、特异性强等优点，易于推广使用。 | ||
| 搜索关键词： | 胰蛋白酶 纳米单元 氧化酶 检测试剂 四甲基联苯胺 催化溶液 水解底物 特异性强 鱼精蛋白 可视化 灵敏度 稳定剂 检测 血清 显色 制备 灵敏 氧气 分析 | ||
【主权项】：
1.一种基于pro‑铂纳米单元模拟氧化酶的胰蛋白酶检测方法，其特征是将胰蛋白酶和pro‑铂纳米单元模拟氧化酶加入到醋酸盐缓冲液中，在40 ℃下温浴10 min后加入3,3',5,5'‑四甲基联苯胺获得显色产物，目视观察颜色变化或测定紫外‑可见吸收；所述的pro‑铂纳米单元模拟氧化酶由以下步骤制得: 将800μl浓度为16 mmol/L 氯铂酸溶液加入40毫升超纯水中,在室温下将800μl浓度为5 mg/mL鱼精蛋白溶液加入搅拌混匀；两分钟后，在30秒内滴入400μl浓度为50mm硼氢化钠用于还原氯铂酸；随后, 混合物在室温下不断搅拌2小时，反应后溶液装入截止分子量为3k的超滤管，6000 r/min离心超滤24小时，并水洗3次，得到鱼精蛋白稳定‑铂纳米单元水溶液，将鱼精蛋白稳定‑铂纳米单元水溶液冷冻干燥得到pro‑铂纳米单元模拟氧化酶粉末。
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