[发明专利]利用HTRF技术同时检测多个细胞因子的方法在审

专利信息
申请号: 201910116614.9 申请日: 2019-02-15
公开(公告)号: CN109799353A 公开(公告)日: 2019-05-24
发明(设计)人: 王维娜 申请(专利权)人: 浠思(上海)生物技术有限公司
主分类号: G01N33/68 分类号: G01N33/68;G01N21/64
代理公司: 暂无信息 代理人: 暂无信息
地址: 200131 上海市浦东新区中国(*** 国省代码: 上海;31
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摘要: 发明公开了一种利用HTRF技术同时检测多个细胞因子的方法,属于细胞因子的检测领域。利用HTRF技术同时检测多个细胞因子的方法,该方法包括如下步骤:步骤一,利用细胞培养板,设置细胞密度及培养体系对细胞进行培养;步骤二,用药物处理细胞,通过优化刺激时间得到最强的信号;步骤三,收集细胞上清,若细胞上清需要稀释,则配置标准曲线;步骤四,将16ul细胞上清加入检测板中,加入4ul标记好的检测抗体混合液,室温孵育;步骤五,用酶标仪读数,并分别用各自标准曲线计算出样品中各细胞因子浓度。本发明的优点在于:提供了新的方法,实现了仅靠试剂就可以完成的多因子检测。
搜索关键词: 细胞因子 细胞 标准曲线 检测 药物处理细胞 酶标仪读数 细胞培养板 检测抗体 检测领域 培养体系 室温孵育 因子检测 混合液 检测板 稀释 刺激 配置 优化
【主权项】:
1.利用HTRF技术同时检测多个细胞因子的方法,其特征在于该方法包括如下步骤:步骤一,利用细胞培养板,设置细胞密度及培养体系对细胞进行培养;步骤二,用药物处理细胞,通过优化刺激时间得到最强的信号;步骤三,收集细胞上清,若细胞上清需要稀释,则配置标准曲线;步骤四,将16ul细胞上清加入检测板中,加入4ul标记好的检测抗体混合液,室温孵育,所述检测抗体混合液标记了HTRF荧光能量供体和受体,其中两个标记了HTRF荧光能量供体和受体的抗体便会以夹心法的形式结合在待测样品上;步骤五,用酶标仪读数,并分别用各自标准曲线计算出样品中各细胞因子浓度。
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