[发明专利]一种基于数字PCR技术快速检测饮用水中贾第鞭毛虫的方法在审
| 申请号： | 201910117851.7 | 申请日： | 2019-02-15 |
| 公开（公告）号： | CN109609670A | 公开（公告）日： | 2019-04-12 |
| 发明（设计）人： | 李红岩;李罗英;张艳芬;于志勇;李洁;郑蓓 | 申请（专利权）人： | 中国科学院生态环境研究中心 |
| 主分类号： | C12Q1/6893 | 分类号： | C12Q1/6893;C12Q1/6851 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 100085*** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | 本发明涉及一种基于数字PCR技术快速检测饮用水中贾第鞭毛虫的方法，是通过对待测水样进行富集浓缩、丙酮溶解、密度梯度分离、提取DNA、数字PCR定量，通过贾第鞭毛虫体内拷贝数与初始DNA浓度换算机理进行换算，得出检测的贾第鞭毛虫的最低个数。结果显示，该方法对贾第鞭毛虫定量可低至0.233个，回收率可达27.15％。该方法选择特异性扩增引物，采用优化的DNA提取条件，利用检测限更低、更灵敏的数字PCR技术进行定量。该方法在优化试剂使用和实验条件的同时，缩短实验时间，提高方法的灵敏度和稳定性。本发明方法特别适用于饮用水中少量贾第鞭毛虫的快速检测，可用于应急监测，具有广阔的推广前景。 | ||
| 搜索关键词： | 数字PCR 快速检测 饮用水 换算 特异性扩增引物 丙酮溶解 方法选择 密度梯度 实验条件 试剂使用 应急监测 提取DNA 拷贝数 灵敏度 检测 富集 可用 水样 回收率 优化 灵敏 浓缩 体内 | ||
【主权项】：
1.一种基于数字PCR技术快速检测饮用水中贾第鞭毛虫的方法，其特征在于利用数字PCR技术对待测水样中富集浓缩后的贾第鞭毛虫提取的DNA进行检测，检测低至单拷贝样品，提高检测灵敏度，而且可对样品进行批量检测，缩短实验时间，降低实验成本。
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