[发明专利]基于半连接PCR技术的二代测序文库构建方法及试剂盒在审
申请号: | 201910119367.8 | 申请日: | 2019-02-18 |
公开(公告)号: | CN111575357A | 公开(公告)日: | 2020-08-25 |
发明(设计)人: | 王力刚 | 申请(专利权)人: | 北京全谱医学检验实验室有限公司 |
主分类号: | C12Q1/6869 | 分类号: | C12Q1/6869;C12Q1/686;C40B50/06 |
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摘要: | 本发明属于分子生物学领域,涉及一种基于半连接PCR技术的二代测序文库构建方法及其应用。本发明实现方式有两种:(1)通过去除打断双链DNA 5’‑磷酸基团,阻断打断后DNA双链两5’端与接头连接;而接头的另一条链含有5’‑磷酸基团,能够与打断后DNA双链两3’端连接,从而实现半连接。(2)通过在连接接头的3’端进行分子修饰,此分子修饰可以阻断接头平末端3’端与打断后DNA的5’端连接。本发明在将双链DNA打断后,通过半连接的方式针对含有UBC序列的DNA区域进行扩增,同时引入测序接头,集合了三种方法的优势,还有效避免了不含UBC序列的形成测序文库,非特异扩增,片断分布不集中等缺点。 | ||
搜索关键词: | 基于 连接 pcr 技术 二代 序文 构建 方法 试剂盒 | ||
【主权项】:
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