[发明专利]纳米复合物及其免标记适体电化学γ-干扰素传感器的制备方法有效

专利信息
申请号: 201910125057.7 申请日: 2019-02-20
公开(公告)号: CN109738500B 公开(公告)日: 2019-08-06
发明(设计)人: 金辉;高小惠;桂日军;王宗花 申请(专利权)人: 青岛大学
主分类号: G01N27/30 分类号: G01N27/30;G01N27/327;G01N27/26;G01N33/531;G01N33/543;B82Y30/00;B82Y15/00
代理公司: 青岛高晓专利事务所(普通合伙) 37104 代理人: 张世功
地址: 266071 山*** 国省代码: 山东;37
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摘要: 发明公开了一种基于树状大分子/金纳米粒/二硫化钼纳米复合物的免标记适体电化学γ‑干扰素传感器的制备方法。滴涂该复合物于电极表面制备改性电极,γ‑干扰素适体链终端巯基通过Au‑S键与金纳米粒连接,制得复合物‑适体的改性电极。当γ‑干扰素存在时,γ‑干扰素与传感器上适体链特异性结合,导致适体发卡结构被打开伸展,可有效吸附电解液中的亚甲基蓝MB,引起MB氧化还原信号显著增强。拟合MB氧化峰电流强度与γ‑干扰素浓度间的线性关系,构建免标记适体电化学γ‑干扰素传感器。与现有技术相比,本发明方法操作简单、成本低廉、灵敏度高、选择性好,可发展成为一种新颖的免标记适体电化学传感器,用于生物样品中γ‑干扰素的高灵敏和高选择性检测。
搜索关键词: 干扰素 适体 传感器 电化学 纳米复合物 复合物 米粒 金纳 制备 电化学传感器 树状大分子 电极表面 二硫化钼 发卡结构 改性电极 高选择性 链特异性 生物样品 线性关系 亚甲基蓝 氧化还原 制备改性 电解液 灵敏度 氧化峰 电极 滴涂 构建 拟合 吸附 巯基 灵敏 伸展 终端 检测
【主权项】:
1.纳米复合物及其免标记适体电化学γ‑干扰素传感器的制备方法,其特征在于,该方法具体包括以下步骤:(1)将二硫化钼(MoS2)粉末加入乙醇和蒸馏水的混合溶剂中,在水浴中超声处理,然后离心分离,去除沉淀物,制得MoS2均质分散液备用;(2)配制氯金酸水溶液,加入聚乙二胺树状大分子(PAMAM)水溶液中,磁力搅拌混合均匀,滴加硼氢化钠水溶液,制备金纳米粒负载的树状大分子(PAMAM/AuNPs),通过透析处理,除去残留反应物;(3)向MoS2分散液中滴加PAMAM/AuNPs分散液,先水浴超声处理,再磁力搅拌处理,反应制得PAMAM/AuNPs/MoS2纳米复合物;(4)在抛光打磨处理的裸玻碳电极表面滴加交联剂Nafion,滴涂纳米复合物分散液,制得PAMAM/AuNPs/MoS2改性的电极;γ‑干扰素核酸适体用缓冲液稀释,加热至一定温度后冷却至室温,适体形成二级发卡结构,适体链巯基终端通过Au‑S键连接至AuNPs表面;(5)在浸没了PAMAM/AuNPs/MoS2‑适体改性电极的电解液中,加入氧化还原探针亚甲基蓝MB,随着靶分子γ‑干扰素加入量的增大,MB的电化学信号峰逐渐增强,拟合MB氧化峰电流强度与γ‑干扰素浓度之间的线性关系,构建用于γ‑干扰素检测的免标记适体电化学传感器。
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