[发明专利]通用无标记LIC载体pMF-LIC及其构建方法与应用在审
| 申请号： | 201910126282.2 | 申请日： | 2019-02-20 |
| 公开（公告）号： | CN109694879A | 公开（公告）日： | 2019-04-30 |
| 发明（设计）人： | 辛翠花;郭江波;池俊玲;肖欢欢;孙玮;贺引弟 | 申请（专利权）人： | 内蒙古科技大学 |
| 主分类号： | C12N15/82 | 分类号： | C12N15/82;C12N15/66;C12N1/21;A01H5/00;A01H6/82;C12R1/01 |
| 代理公司： | 北京酷爱智慧知识产权代理有限公司 11514 | 代理人： | 高江玲 |
| 地址： | 014010 内蒙古*** | 国省代码： | 内蒙古;15 |
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| 摘要： | 本发明涉及一种通用无标记LIC载体pMF‑LIC及其构建方法与应用，其是以质粒pJG100为模板，以SEQ ID No.1和SEQ ID No.2为引物对进行PCR扩增，得到目的片段LIC序列；将目的片段LIC序列用限制性内切酶Xba I和Sac I双酶切，再与经同样双酶切的pMF‑Npt II质粒连接，获得通用无标记LIC载体pMF‑LIC。本发明提供的pMF‑LIC载体使用安全，除引入目的基因外不含任何载体的骨架序列；简便，外源待克隆PCR片段不需要酶切和连接反应；高效，不依赖连接酶，很大程度简化了DNA重组过程，且完全靠粘性末端配对退火，载体自连背景低；可以批量处理；成本低。 | ||
| 搜索关键词： | 无标记 目的片段 双酶切 构建 质粒 通用 退火 限制性内切酶 骨架序列 连接反应 目的基因 载体使用 粘性末端 连接酶 酶切 外源 引物 配对 应用 克隆 引入 安全 | ||
【主权项】：
1.一种通用无标记LIC载体pMF‑LIC，其特征在于：所述通用无标记LIC载体pMF‑LIC是采用质粒pMF‑Npt II和LIC序列构建而成。
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