[发明专利]一种用于检测血流感染致病菌的样本处理方法在审

专利信息
申请号: 201910132693.2 申请日: 2019-02-22
公开(公告)号: CN110195096A 公开(公告)日: 2019-09-03
发明(设计)人: 朱留伟;夏江;董德坤 申请(专利权)人: 领航基因科技(杭州)有限公司
主分类号: C12Q1/6806 分类号: C12Q1/6806;C12Q1/04
代理公司: 北京集佳知识产权代理有限公司 11227 代理人: 刘猛;赵青朵
地址: 310000 浙江省杭州市江*** 国省代码: 浙江;33
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摘要: 发明涉及临床检测技术领域,公开了一种用于检测血流感染致病菌的样本处理方法。本发明将待测样本进行红细胞裂解,然后将所得沉淀中加入血细胞裂解液以及指示溶剂混匀,蛋白裂解并孵育,离心后获取所述指示溶剂及其下层的沉淀,获得分离样本;将所述分离样本同时进行RNA和DNA提取,即最终获得混合核酸溶液。本发明先红细胞裂解再用血细胞裂解液裂解可最大限度保证致病菌不被裂解,高效保证血液样本中致病菌的分离;利用活菌体中RNA水平远远高于基因组DNA拷贝数的特性,同时提取致病菌的基因组DNA和RNA,相对于常规的致病菌检测方案中的样本预处理,能够保证微量致病菌的阳性检出率。
搜索关键词: 致病菌 裂解 红细胞 基因组DNA 分离样本 血流感染 样本处理 裂解液 溶剂 沉淀 临床检测技术 样本预处理 致病菌检测 血细胞 待测样本 核酸溶液 血液样本 用血细胞 常规的 活菌体 检出率 拷贝数 保证 检测 孵育 混匀 下层 蛋白
【主权项】:
1.一种用于检测血流感染致病菌的样本处理方法,其特征在于,包括:步骤1、待测血液样本加入红细胞裂解液进行裂解,将红细胞裂解后的样本通过离心获得包含菌体及白细胞的沉淀,往所述沉淀中加入血细胞裂解液以及与血液不互溶且密度大于全血密度的介质混匀,蛋白裂解并孵育,离心后获取所述介质及其下层的沉淀,获得分离样本;步骤2、将所述分离样本同时进行RNA和DNA的提取,获得混合核酸溶液;其中,所述血细胞裂解液为盐酸胍或山梨醇的RNase‑free水溶液。
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