[发明专利]鸡胚移植瘤模型建立方法及其在药物敏感性检测中的应用

摘要

本发明公开一种鸡胚移植瘤模型建立方法及其在药物敏感性检测中的应用，其主要包括以下步骤：鸡胚制备，肿瘤标本采集，肿瘤样本处理，组织块接种，药物处理，敏感性检测和和结果分析，分析时根据各组鸡胚上接种的肿瘤块体积、重量和病理改变，进而计算出每种药物对肿瘤组织块活性的影响。本发明保存了肿瘤的异质性和微环境，操作简单，实验条件要求低，可以快速、准确的筛选出最适合患者的肿瘤化疗方案。

主权项

1.一种鸡胚移植瘤模型，所述鸡胚在恒温恒湿全自动孵蛋器中孵育，所述模型包括孵育8天的鸡胚、离体处理后的具有活性的肿瘤组织块、食品级硅胶O型圈和Matrigel胶，其中，所述Matrigel胶用于促进鸡胚上毛细血管更快的覆盖肿瘤组织，提高肿瘤组织存活率，其特征在于，所述离体处理具体为：首先，将切取的肿瘤组织迅速装入含有组织保存液的离心管中，通过冰包进行2至8℃的低温环境保存和运输；然后，在实验室生物安全柜内将离心管中的组织取出放入一次性无菌细胞培养皿中用0.4%的台盼蓝染液检测所述肿瘤组织的活性，剔除没有活性的肿瘤组织及周围结缔组织；然后，将肿瘤组织放入碘伏溶液中浸泡消毒，再用含有PBS的缓冲液冲洗；最后，将所述肿瘤组织分割成若干2×2×2mm³规整的肿瘤组织块，装入无菌离心管中，所述无菌离心管放在冰上或者冰盒中预冷；所述肿瘤组织接种鸡胚的具体步骤为：将4℃预冷后的所述Matrigel胶与所述无菌离心管中的肿瘤组织块充分混合预定时间，得到混合物；所述食品级硅胶O型圈的直径为10mm，放置在所述孵育8天的鸡胚内的气室和尿囊膜上大血管分叉处，所述食品级硅胶O型圈中放入含有至少一块所述肿瘤组织块的所述混合液。