[发明专利]提高嗜酸乳杆菌发酵与冻干活菌数的培养基处理方法在审
申请号: | 201910140769.6 | 申请日: | 2019-02-26 |
公开(公告)号: | CN109749964A | 公开(公告)日: | 2019-05-14 |
发明(设计)人: | 宋锦安;马章献;陈齐;郑建丰 | 申请(专利权)人: | 润盈生物工程(上海)有限公司 |
主分类号: | C12N1/20 | 分类号: | C12N1/20;C12N1/04;C12R1/23 |
代理公司: | 北京连城创新知识产权代理有限公司 11254 | 代理人: | 刘伍堂 |
地址: | 201700 上*** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | 本发明涉及菌种培养基技术领域,具体地说是一种提高嗜酸乳杆菌发酵与冻干活菌数的培养基处理方法。本发明同现有技术相比,根据嗜酸乳杆菌营养需求,在添加有机豌豆蛋白粉增菌试验的基础上,减少发酵液离心、乳化、冻干后的杂质,以提高嗜酸乳杆菌冻干菌粉的活菌数。 | ||
搜索关键词: | 嗜酸乳杆菌 培养基处理 菌数 发酵 菌种培养基 豌豆蛋白粉 冻干菌粉 营养需求 发酵液 活菌数 冻干 增菌 乳化 试验 | ||
【主权项】:
1.一种提高嗜酸乳杆菌发酵与冻干活菌数的培养基处理方法,其特征在于:按如下步骤进行:步骤1,在250ml平底瓶中装200ml的MRS种子培养基,接种保存的嗜酸乳杆菌甘油管,置于37℃恒温培养箱并静置培养12小时,形成嗜酸乳杆菌种子;步骤2,转接2%的嗜酸乳杆菌种子至200ml的MRS种子培养基中,培养6至8小时,形成2%嗜酸乳杆菌种子;步骤3,取10g/L的有机豌豆蛋白粉,倒入含10%质量浓度酒精的水中,搅拌均匀,在35~40℃的温度下,浸泡3小时,浸泡完成后,在60℃~80℃的温度下,蒸煮2小时,形成蒸煮后的有机豌豆蛋白粉;步骤4,蒸煮后的有机豌豆蛋白粉采用6000r/min的速度进行10分钟的离心,离心后,取上清加水定容至2L,加入发酵培养基原料并搅拌均匀,用质量浓度为20%的NaOH溶液调整pH值至7.0,在115℃的温度下进行15分钟的灭菌处理后,冷却至室温,形成发酵培养基;步骤5,将2%嗜酸乳杆菌种子放入发酵培养基中,置于37℃恒温培养箱并静置培养12小时后,检测OD600值、pH值及发酵液活菌数;步骤6,采用6000r/min的速度进行15分钟的离心,形成菌泥,加入菌泥重量20%的乳粉,乳化15分钟,在温度‑80℃条件下,预冻4小时,预冻后,在冷阱温度低于‑55℃,真空度0.1Pa条件下,冷冻干燥22~30小时,形成冻干粉。
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