[发明专利]基于硫化银光热效应的生物传感器及其制备方法和应用以及NF-kB1的定量检测方法

摘要

本发明公开了一种基于硫化银光热效应的生物传感器及其制备方法和应用以及NF‑kB1的定量检测方法，通过氨基和羧基缩合反应将末端修饰氨基且含有NF‑kB1结合位点、部分配对的DNA双链修饰在羧基功能的孔板中，并且与一条引发链通过胡斯坦碱基配对构成DNA三链结构，加入少量银离子强化这种结构稳定性。再加入富胞嘧啶的首尾部分配对的两条发夹DNA，在引发链作用下诱导HP1和HP2发生杂交链式反应，并加入银离子在富C部分构成C‑Ag+‑C超夹心结构。当加入转录因子NF‑kB1后，NF‑KB1会与DNA双链结合，释放出杂交链上的大量Ag+。Ag+与ZnS反应置换出的Ag2S在808nm近红外激光的照射下会产生明显的光热效应。进而使用简单的温度计即可实现对于NF‑kB1浓度的定量检测，该检测方法的灵敏度高，且操作方便。

主权项

1.一种基于硫化银光热效应的生物传感器的制备方法，其特征在于，所述制备方法包括以下步骤：(1)将等体积等摩尔浓度的DNA S1溶液和DNA S2溶液混合并稀释，加热反应后得到双链dsDNA溶液；(2)将等体积等摩尔浓度的HP1溶液、HP2溶液混合并稀释得到未杂交的HPs溶液，向未杂交的HPs溶液中加入等体积的硝酸银溶液，于黑暗中反应后得到包含C‑Ag⁺‑C的未杂交HPs溶液；(3)向羧基功能化的孔板中加入双链dsDNA溶液，反应后回收双链dsDNA溶液；(4)继续向羧基功能化的孔板中加入Trigger溶液和硝酸银溶液；(5)步骤(4)反应结束后，继续向羧基功能化的孔板中加入步骤(2)得到的包含C‑Ag⁺‑C的未杂交HPs溶液；(6)步骤(5)反应结束后，继续向羧基功能化的孔板中加入转录因子NF‑kB1溶液，即可得到基于硫化银光热效应的生物传感器。