[发明专利]细菌双杂交纳米抗体筛选系统及其构建方法和应用在审
申请号: | 201910145037.6 | 申请日: | 2019-02-27 |
公开(公告)号: | CN109929031A | 公开(公告)日: | 2019-06-25 |
发明(设计)人: | 汪洋;杨慕晗;程鑫茹;李晓波;王玉琪;连慧慧 | 申请(专利权)人: | 南京理工大学 |
主分类号: | C07K16/00 | 分类号: | C07K16/00;C12N15/70;C12N1/21;C12R1/19 |
代理公司: | 南京理工大学专利中心 32203 | 代理人: | 刘海霞 |
地址: | 210094 *** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | 本发明公开了一种细菌双杂交纳米抗体筛选系统及其构建方法和应用。所述的细菌双杂交纳米抗体筛选系统由含有LexAWT基因元件的pMHA2质粒和含有LexA408基因元件的pMHN2质粒组成。嵌合型双抑制子LexAWT/LexA408可以联同抗原抗体相互作用抑制下游PsulA‑cI857基因的表达,间接激活PR‑KanR基因的表达,构建严谨高效的纳米抗体阳性筛选系统。候选纳米抗体为合成文库,采用简并引物的方式在CDR3区域引入48个随机碱基并去除了终止密码子以及半胱氨酸密码子。本发明的细菌双杂交纳米抗体筛选系统能够快速、高效、准确地筛选给定抗原的纳米抗体。 | ||
搜索关键词: | 纳米抗体 细菌双杂交 筛选系统 构建 基因元件 质粒 终止密码子 半胱氨酸 合成文库 简并引物 抗原抗体 随机碱基 阳性筛选 密码子 抑制子 抗原 嵌合 应用 激活 筛选 基因 引入 | ||
【主权项】:
1.细菌双杂交纳米抗体筛选系统,其特征在于,包括全长序列为SEQ ID NO.9的重组质粒载体pMHA2和全长序列为SEQ ID NO.13的重组质粒载体pMHN2。
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