[发明专利]高通量建立甘油三酯LC-MS/MS数据库的方法

摘要

本发明属于应用化学领域，具体涉及一种高通量准确建立生物样本中甘油三酯LC‑MS/MS数据库的方法。所述方法包括：1)理论推导生物样本中甘油三酯化合物的分子量；2)根据甘油三酯化合物在较低能量下的质谱裂解规律，以及酯质化合物在反相色谱上表现出的规律，推测出生物样本中各甘油三酯化合物相应的的保留时间；3)进一步通过甘油三酯化合物在较高能量下的质谱裂解规律，验证保留时间；最终建立甘油三酯化合物的LC‑MS/MS数据库。本发明所述方法快速简单，且耗费少、适用性强，既可以用于不同生物样本中甘油三酯化合物的分析，也可以用于其他类型酯质或酯质类似物的高通量分析。

主权项

1.一种高通量准确建立生物样本中甘油三酯LC‑MS数据库的方法，其特征在于，包括如下步骤：(1)理论推导生物样本中甘油三酯化合物的分子量：已知甘油三酯含三条酯肪酸链，每条酯肪酸链的表示形式为n:m，其中n代表碳原子个数，m代表双键个数，n:m共计20种选择，三三组合，理论上构成了20*20*20/6共1000个甘油三酯化合物；根据已知的甘油三酯化合物的精确分子量，利用不同甘油三酯化合物之间碳原子个数和双键个数的差别，推导出其他所有未知分子量的甘油三酯化合物的分子量；(2)推测生物样本中甘油三酯化合物的保留时间：根据甘油三酯化合物在较低能量CE＝30eV下的质谱裂解规律，推导得到生物样本中的甘油三酯化合物在MRM模式下对应的1800个Q1/Q3离子对信息；设定CE＝30eV，输入1800个Q1/Q3离子对信息，将生物样本上机测试获得相应谱图，根据酯质化合物在反相色谱上表现出的规律，推测出生物样本中各甘油三酯化合物相应的保留时间；(3)验证保留时间：利用甘油三酯化合物在较高能量CE＝60eV下的质谱裂解规律，获得生物样本中的甘油三酯化合物在MRM模式下对应的1800个Q1/Q3离子对信息；设定CE＝60eV，输入1800个Q1/Q3离子对信息，将生物样本上机测试获得相应谱图，根据酯质化合物在反相色谱上表现出的规律，再次推测生物样本中各甘油三酯化合物相应的保留时间，所得推测结果用于与步骤(2)推测所得保留时间结果进行比较验证；(4)进一步验证保留时间：选取若干个生物样本中常见甘油三酯化合物的标准品，设定CE＝30eV，上机测试相应的保留时间，将该结果与步骤(2)推测所得甘油三酯化合物的保留时间进行比较、并对谱图上其他甘油三酯化合物的保留时间进行校正；最终得到了有效的离子对及相应的保留时间信息；(5)生物样本中甘油三酯化合物LC‑MS/MS数据库的建立：当一个甘油三酯分子中有两个或三个酯肪酸链相关的离子对出峰时，默认检测到了该物质，通过这种推算方法，最终建立了甘油三酯化合物的LC‑MS/MS数据库。