[发明专利]一类细胞内形成纳米结构杀死癌细胞的前体药物及其制法

摘要

本发明公开了一类细胞内形成纳米结构杀死癌细胞的前体药物及其制备方法，特征是该前体药物含有苯并噻唑氰‑D型半胱氨酸结构，能够利用癌细胞内高浓度的还原剂和特异性高表达的酶控制小分子前药发生苯并噻唑氰与半胱氨间的点击反应形成纳米结构的过程，从而控制药物对癌细胞和正常细胞的毒性。与已有的利用组胞内组装单体亲疏水性或浓度改变原位获得纳米药物的前体药物相比，本发明对前药的亲疏水性要求更低，且由于所用的点击反应可被pH、酶以及生物小分子等多种因素控制，因而前药可以根据具体需要进行多种修饰，具有更广的应用范围。本发明填补了利用点击反应触发无毒小分子前药原位形成抗癌纳米药物的空白。

主权项

1.一种可在癌细胞内发生苯并噻唑氰与半胱氨酸间点击反应形成纳米结构杀死癌细胞并不损伤正常细胞的小分子前体药物_D‑2的制备方法，其特征在于：第一步，将7.2毫摩尔2,2’‑二硫二吡啶溶于3毫升脱气甲醇，在氮气保护下逐滴加入4.8毫摩尔溶解于8毫升脱气甲醇的乙硫醇溶液，将混合溶液在氮气保护下室温搅拌过夜，用旋转蒸发仪去除甲醇后，用高效液相色谱分离提纯，得到第一种纯化合物A；第二步，将两口烧瓶反复抽真空通氮气三次以去除烧瓶中的氧气，将1.3毫摩尔化合物A溶解于2毫升脱气N，N‑二甲基甲酰胺溶液，在氮气保护下加入烧瓶中；将1.2毫摩尔N‑叔丁氧羰基‑D型半胱氨酸溶解于1.4毫升脱气N，N‑二甲基甲酰胺，在氮气保护下逐滴加入上述溶液中，混合溶液在氮气保护下室温搅拌12小时后，经过高效液相色谱分离提纯，得到第二种纯化合物B；第三步，将0.4毫摩尔化合物B溶解于1毫升无水四氢呋喃中，加入2毫摩尔4‑甲基吗啉，将混合溶液冷却至0℃后加入0.4毫摩尔氯甲酸异丁酯，在0℃下搅拌1小时；将0.48毫摩尔2‑氰基‑6‑氨基苯并噻唑溶解于3毫升无水四氢呋喃中，并用注射器加入上述反应混合液中，在0℃下继续搅拌2小时，然后于室温下搅拌过夜，经过高效液相色谱分离提纯后，得到第三种纯化合物C；第四步，将0.2毫摩尔化合物C溶解于20毫升含95％体积浓度三氟乙酸的二氯甲烷溶液中，加入200微升三异丙基硅烷，室温下搅拌反应3小时，经过高效液相色谱分离提纯后，即可得到第四种纯化合物前药_D‑2。