[发明专利]从微量酒精溶液保存样品中快速提取高浓度DNA的方法

摘要

本发明公开了从微量酒精溶液保存的样品中提取高浓度DNA的方法。通过10%甘油溶液37°C浸泡样品10min，再纯水洗涤1遍后，采用组织裂解液55°C裂解1小时后加入2倍裂解液体积的纯水后，加入3倍裂解液体积的提纯液混匀5min后6000rpm离心5min，将上清液移入新1.5ml离心管中加入沉淀试剂4°C沉淀2h后13000rpm常温离心5 min弃上清，加入1.0ml 70%乙醇洗涤2min，13000rpm离心5min后弃上清，自然风干后加入30μl无菌水溶解DNA。本方法能够得到操作方便、简单，能够得到满足后续PCR扩增的高浓度DNA。

主权项

1.一种从微量酒精溶液保存样品中快速提取高浓度DNA的方法，其特征在于，通过10%甘油溶液浸泡酒精保存样品后纯水洗涤1遍，采用组织裂解液55°C裂解1小时后加入一定体积的纯水后，加入一定体积的提纯液混匀5min后6000rpm离心5min,将上清液移入新1.5ml离心管中,加入沉淀试剂4°C沉淀2 h后13000 rpm常温离心5 min弃上清，加入1.0 ml 70%乙醇洗涤2 min，13000 rpm离心5 min后弃上清，自然风干后加入30μl无菌水溶解即可得到高浓度DNA溶液。所述的组织裂解液每100 ml含有10 ml浓度为1M、pH为8.0的Tris‑HCl溶液、1 g SDS和3.7224 g EDTA·Na₂；所述的提纯液为24:1比例的氯仿:异戊醇混合液；所述的沉淀试剂为2倍体积的无水乙醇和1/10体积的3 M浓度醋酸钠溶液。