[发明专利]一种无毒性的产气荚膜梭菌重组ε毒素和α毒素融合蛋白疫苗及其生产方法有效

专利信息
申请号: 201910159102.0 申请日: 2019-03-04
公开(公告)号: CN109745554B 公开(公告)日: 2022-05-20
发明(设计)人: 刘莹;陈小云;杜吉革;薛麒;朱真;王磊;张莹辉;印春生;李启红;姚文生;康凯 申请(专利权)人: 中国兽医药品监察所
主分类号: A61K39/08 分类号: A61K39/08;A61K39/116;A61P31/04
代理公司: 北京君智知识产权代理事务所(普通合伙) 11305 代理人: 郑明
地址: 100081 *** 国省代码: 北京;11
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摘要: 发明涉及一种无毒性的产气荚膜梭菌重组ε毒素和α毒素融合蛋白疫苗及其生产方法。该疫苗含有的无毒性产气荚膜梭菌ETX突变体和CPA的C末端融合蛋白rETXm3CPAC是通过将无毒性的ETX突变体ETXm3和CPA的C末端(CPAC)进行串联,并在大肠杆菌BL21(DE3)中实现可溶性表达,既可最大限度地保留天然毒素蛋白的空间构象,从而保持其免疫原性;又避免了包涵体变性复性的繁琐工艺对抗原蛋白免疫原性的影响,减少了疫苗的制备时间和生产成本。在rETXm3CPAC的C端含有6个组氨酸(6*His)标签,便于蛋白的纯化;获得的毒素融合蛋白在小鼠体内完全无毒,且在家兔模型中呈现良好的安全性、免疫原性和免疫保护性。疫苗还具有制备工艺简单,疫苗效力优良、同时预防A和D型产气荚膜梭菌病。
搜索关键词: 一种 毒性 荚膜 重组 毒素 融合 蛋白 疫苗 及其 生产 方法
【主权项】:
1.一种无毒性的产气荚膜梭菌ε毒素和α毒素融合蛋白疫苗,其特征在于所述疫苗含有采用大肠埃希氏菌表达的产气荚膜梭菌ε毒素(ETX)多氨基酸位点突变体和产气荚膜梭菌α毒素(CPA)C末端(CPAC)的毒素融合蛋白;制苗用菌种为表达重组毒素融合蛋白的大肠埃希氏菌,被命名为大肠埃希氏菌(Escherichia coli)BL13株,该菌株已于2018年01月18日送交北京市朝阳区北辰西路1号院3号中国科学院微生物研究所中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心保藏,保藏编号为:CGMCC No.15237;所述表达的无毒性的产气荚膜梭菌ε毒素和α毒素融合蛋白与野生型产气荚膜梭菌ε毒素成熟毒素相比,包含多个氨基酸的突变以及在C端添加便于蛋白的纯化的标签。
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