[发明专利]一种基于聚合物点的光电和温度双信号响应的唾液酸生物传感器的制备与应用

摘要

本发明公开一种基于聚合物点的光电和温度双信号响应的唾液酸生物传感器的制备与应用。该传感器利用富勒烯（C₆₀）和金锥两种纳米材料作为传感器的基底，利用Au‑S键的键合作用固定巯基苯硼酸（MPBA）分子，使其捕获大量的唾液酸（SA）分子。利用间四苯酚掺杂的聚合物点（TPP‑pdot）功能化的扇形金红石型的二氧化钛（R‑TiO₂）标记的抗体作为探针分子，既具有优异的光电流响应又有良好的温度响应，得到一种双信号读出模式。基于以上优点，构制了一种双信号响应的生物传感器，实现了对唾液酸的高灵敏检测，该传感器相比于传统的单信号读出的传感器，准确度更高，稳定性更好，很大程度上避免了检测结果的假阳性或者假阴性。

主权项

1.一种基于聚合物点的光电和温度双信号响应的唾液酸生物传感器的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：（1）在湿润的麂皮上依次用50纳米和30纳米的氧化铝粉末对玻碳电极（GCE）进行机械打磨抛光，直至电极表面光亮洁净，用去离子水冲洗电极表面残余的氧化铝粉末，最后用无水乙醇和二次去离子水进行彻底清洗；（2） 滴加3μL浓度为3mg/mL的富勒烯（C₆₀）溶液至抛光干净的玻碳电极表面，放至红外灯箱内烘干后取出，室温下冷却，制得C₆₀修饰得玻碳电极；（3）滴加3μL浓度为3mg/mL的金纳米（Au）溶液于步骤（2）所制得的电极表面，放至红外灯箱内烘干，冷却至室温，制得Au/C₆₀修饰的玻碳电极；（4）滴加3μL浓度为5.0mM的巯基苯硼酸（MPBA）溶液至步骤（3）所制得的电极表面，室温下反应40min后用二次去离子水进行冲洗，除去电极表面的物理吸附，晾干备用，制得MBPA/Au/C₆₀修饰的玻碳电极；（5） 滴加3μL不同浓度的唾液酸（SA）标准溶液至步骤（4）所获得的电极表面，于4°C冰箱中孵育40 min，反应完成后用二次去离子水冲洗除去多余的SA分子，晾干，得到SA/MBPA/Au/C₆₀修饰的玻碳电极，并保存在4°C冰箱中；（6） 取3 μL 浓度为 1.0 wt.% 的BSA 滴加到步骤 ( 5) 所制得的修饰电极表面并在4°C冰箱中孵育40 min, 来封闭电极表面上非特异性活性位点，用去离子水冲洗电极表面洗去物理吸附，并保存在4°C冰箱中；（7）最后滴加3μL浓度5mg/mL的聚合物点功能化的扇形金红型的二氧化钛标记的二抗溶液（R‑TiO₂@TPP‑Pdot @Ab₂）于步骤（6）所制得的电极表面，免疫识别40min后，用二次去离水冲洗；晾干，制得R‑TiO₂@TPP‑Pdot @Ab₂/SA/MBPA/Au/C₆₀修饰的玻碳电极为待测电极。