[发明专利]一种基于液相色谱串联质谱测定医用食品中维生素的方法

摘要

本发明涉及医用食品中维生素的测定技术领域，特别涉及一种基于液相色谱串联质谱测定医用食品中维生素的方法，包括水溶性维生素检测前处理；脂溶性维生素检测前处理；标准曲线的制备；液相色谱条件；质谱条件；测定法；空白试验；计算；检测方法灵敏度、准确度和精密度。本发明提供的技术方案带来的有益效果是：将现阶段的维生素的检测方法进行优化，完成省时、省力、省料、高效准确的方法研究，极大的提高特医食品的检验效率，不仅能推动企业自身的发展，同时对监管的方便有效也有极大的促进作用。实现医用食品14种维生素同时检测的标准化，大大缩短医用食品中维生素测定时间。

主权项

1.一种基于液相色谱串联质谱测定医用食品中维生素的方法，其特征在于，具体包括以下步骤：S1.样品制备1.1水溶性维生素检测前处理准确称取样品2g混合均匀的样品于50mL棕色容量瓶中，加入40mL水，超声1min，冷却至室温，用水定容至刻度，摇匀；取10mL溶液于离心管中，加入20mL100％浓度的乙醇，摇晃混匀2min，3500r/min离心15min；上清液过0.22μm滤膜后供高效液相色谱‑串联质谱法测定；1.2脂溶性维生素检测前处理准确称取样品2g经均质处理的试样于50mL具塞离心管中，加入60℃热水10mL溶解样品，加入0.4g抗坏血酸，20mL乙醇，10mL20％的氢氧化钾溶液，涡旋30s后放入恒温振荡器中，80℃避光水浴30min，取出放入冷水浴降温；冷却后溶液中加入20mL正己烷，振荡10min，6000r/min离心3min，取上层有机相，水相再加入20mL正己烷，合并有机相，净化；上清液过0.22μm滤膜后供高效液相色谱‑串联质谱法测定；S2、标准曲线的制备准确吸取适量的维生素混合标准工作液，用空白基质溶液将其稀释成质量浓度分别为0μg/L、10.0μg/L、20.0μg/L、50.0μg/L、100μg/L、150μg/L、200μg/L供高效液相色谱‑串联质谱法测定；S3、测定3.1液相色谱条件(1)色谱柱：ACQUITY UPLC BEH C18 1.7μm；(2)流动相：A：5mM乙酸铵+0.1％甲酸水溶液，B：0.1％甲酸甲醇溶液；(3)流速：0.4mL/min；(4)柱温：40℃；(5)进样量：10μL3.2质谱条件(1)离子源：电喷雾离子源，正离子模式；(2)扫描方式：多反应监测；(3)脱溶剂气、锥孔气、碰撞气均为高纯氮气或其他合适的高纯气体；使用前应调节各气体流量以使质谱灵敏度达到检测要求；(4)毛细管电压、锥孔电压、碰撞能量等电压值优化至最优灵敏度；(5)监测离子3.3测定法测定样品溶液，分别得到样品中各维生素色谱峰面积，代入校正曲线计算含量；以超纯水作为空白样品，在相同条件下进行测定，计算空白样品中各维生素本底值，即得各样品中维生素含量；样品溶液中各维生素的响应值均应在仪器测定的线性范围之内；S4、空白试验除不加试样外，采用完全相同的测定步骤进行平行操作；S5、计算计算样品中各维生素的含量：式中：X‑样品中各维生素组分的含量，单位为克每千克；c‑样品浓度，单位为μg/mL；V‑试样总体积，单位为毫升；f‑稀释倍数；100‑试样中量以每100g计算的换算系数；m‑试样质量，单位为克；S6、检测方法灵敏度、准确度和精密度6.1灵敏度6.2准确度6.3精密度。