[发明专利]一种用于常规抗衰老治疗的人源脐带间充质干细胞制剂的制备方法

摘要

本发明涉及一种用于常规抗衰老治疗的人源脐带间充质干细胞制剂的制备方法，包括脐带组织块的获取步骤、干细胞的原代培养步骤、干细胞的传代培养步骤、干细胞的冻存步骤、干细胞的复苏与培养步骤和人源脐带间充质干细胞制剂的制备步骤；所述人源脐带间充质干细胞制剂的制备步骤包括采用5%葡萄糖注射液重悬传代培养至P_e代人源脐带间充质干细胞，待P_e代人源脐带间充质干细胞悬液均匀后，补充5%葡萄糖注射液，调节P_e代人源脐带间充质干细胞浓度4×10⁴‑6×10⁴个/mL得到人源脐带间充质干细胞制剂；其中e=6、7、8、9、10。本发明完善人源脐带间充质干细胞的储备，保障了人源脐带间充质干细胞的存活率、增殖能力和特异性。

主权项

1.一种用于常规抗衰老治疗的人源脐带间充质干细胞制剂的制备方法，其特征在于，包括脐带组织块的获取步骤、干细胞的原代培养步骤、干细胞的传代培养步骤、干细胞的冻存步骤、干细胞的复苏与培养步骤和人源脐带间充质干细胞制剂的制备步骤；所述干细胞的冻存步骤包括待P_m代人源脐带间充质干细胞达80‑90%汇合度时，弃去上清液，加入0.5wt%的Tryple‑Express消化液，待消化完全后，加入完全培养液终止消化，离心并弃去上清液，用生理盐水对P_m代人源脐带间充质干细胞清洗，并在无血清间充质干细胞冻存液中重悬，将P_m代人源脐带间充质干细胞悬液分装于冻存管中并封口，立即将冻存管放置于程序降温盒后并立即将程序降温盒放置于‑80℃的冰箱中冻存12‑24小时，之后将冻存管取出并立即放置于液氮中冻存；所述人源脐带间充质干细胞制剂的制备步骤包括采用5%葡萄糖注射液重悬传代培养至P_e代人源脐带间充质干细胞，反复吹洗，待P_e代人源脐带间充质干细胞悬液均匀后，补充5%葡萄糖注射液，调节P_e代人源脐带间充质干细胞浓度为4×10⁴‑6×10⁴个/mL，得到人源脐带间充质干细胞制剂；其中，e=6、7、8、9、10。