[发明专利]基于GAL4-UAS系统的CRISPR辅助反式增强子激活基因表达的方法及其应用有效

专利信息
申请号: 201910180582.9 申请日: 2019-03-11
公开(公告)号: CN109929865B 公开(公告)日: 2022-03-08
发明(设计)人: 王进科;徐新慧 申请(专利权)人: 东南大学
主分类号: C12N15/67 分类号: C12N15/67;C12N15/113;C12N15/90
代理公司: 南京苏高专利商标事务所(普通合伙) 32204 代理人: 孙斌
地址: 211102 江*** 国省代码: 江苏;32
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摘要: 发明公开了一种基于GAL4‑UAS系统的CRISPR辅助反式增强子激活基因表达的方法及其应用,该激活基因表达的方法通过CRISPR‑GAL4‑UAS系统将增强子DNA反式募集到靶基因上,依靠反式增强子DNA本身以及反式增强子DNA与CRISPR系统的互作,激活靶基因表达。本发明通过对常规dCas9的改造发展了一种捕获dCas9(cdCas9);借助cdCas9/sgRNA复合物中cdCas9融合GAL4与带UAS序列的巨细胞病毒(CMV)增强子DNA的结合,将CMV增强子反式募集到靶基因上,高效激活靶基因的表达;本发明的方法在生物医学中具有广泛应用价值,可以应用在制备生物检测及治疗试剂中。
搜索关键词: 基于 gal4 uas 系统 crispr 辅助 反式 增强 激活 基因 表达 方法 及其 应用
【主权项】:
1.一种基于GAL4‑UAS系统的CRISPR辅助反式增强子激活基因表达的方法,其特征在于,通过融合GAL4的CRISPR系统将带有UAS序列的增强子DNA反式募集到靶基因上,依靠带有UAS序列的反式增强子DNA本身以及带有UAS序列的反式增强子DNA与结合GAL4的CRISPR系统的互作,激活靶基因表达。
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