[发明专利]用于肺炎支原体检测的PCR-内控核酸试纸条检测方法在审
申请号: | 201910184282.8 | 申请日: | 2019-03-12 |
公开(公告)号: | CN109750116A | 公开(公告)日: | 2019-05-14 |
发明(设计)人: | 廉婷;陈程;姚杨;邱忠营;李慧瑾;李银未 | 申请(专利权)人: | 西安医学院 |
主分类号: | C12Q1/689 | 分类号: | C12Q1/689;C12Q1/686;C12Q1/04;C12N15/11;C12R1/35 |
代理公司: | 西安弘理专利事务所 61214 | 代理人: | 韩玙 |
地址: | 710021 *** | 国省代码: | 陕西;61 |
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摘要: | 本发明公开了基于PCR‑内控核酸试纸条的肺炎支原体检测方法,具体按照下述步骤进行:针对肺炎支原体的16S rRNA核酸序列设计修饰有地高辛和生物素的MP特异性引物,针对人β珠蛋白基因的核酸序列设计修饰有地高辛和荧光素Cy3的β珠蛋白基因引物;提取待测样本的DNA、以待测样本的DNA为模板,以MP特异性引物和β珠蛋白基因引物为引物进行PCR扩增得到待测样本DNA扩增产物,并加入UNG酶防污染技术和内控分别用于避免假阳性和假阴性结果。将待测样本DNA扩增产物使用肺炎支原体检测内控核酸试纸条进行检测。本发明基于PCR‑内控核酸试纸的肺炎支原体检测方法,操作简单,能够快速检测肺炎支原体。 | ||
搜索关键词: | 肺炎支原体检测 内控 待测样本 核酸试纸条 肺炎支原体 特异性引物 核酸序列 基因引物 扩增产物 地高辛 修饰 人β珠蛋白基因 假阴性结果 核酸试纸 快速检测 防污染 假阳性 生物素 荧光素 检测 引物 | ||
【主权项】:
1.基于PCR‑内控核酸试纸条的肺炎支原体检测方法,其特征在于,具体按照下述步骤进行:步骤1,针对肺炎支原体的16S rRNA核酸序列设计修饰有地高辛和生物素的MP特异性引物;针对人β珠蛋白核酸序列设计修饰有地高辛和荧光素Cy3的β珠蛋白基因引物;提取待测样本的DNA;步骤2,以待测样本的DNA为模板,以所述MP特异性引物和β珠蛋白基因引物为引物同时进行PCR扩增,得到扩增产物;步骤3,将所述扩增产物使用肺炎支原体检测内控核酸试纸条进行检测。
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