[发明专利]一种血浆中曲司氯铵的定量检测方法在审
| 申请号： | 201910185419.1 | 申请日： | 2019-03-12 |
| 公开（公告）号： | CN109884205A | 公开（公告）日： | 2019-06-14 |
| 发明（设计）人： | 李高;张媛 | 申请（专利权）人： | 康诚科瑞医药研发（武汉）有限公司 |
| 主分类号： | G01N30/02 | 分类号： | G01N30/02;G01N30/06 |
| 代理公司： | 成都顶峰专利事务所(普通合伙) 51224 | 代理人： | 陈夏 |
| 地址： | 430000 湖北省武汉市东湖新技术开发*** | 国省代码： | 湖北;42 |
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| 摘要： | 本发明属于曲司氯铵检测技术领域，公开了一种血浆中曲司氯铵的定量检测方法，包括如下步骤：(1)标准工作溶液的配制：分别将所述曲司氯铵储备液用体积比为1:1的甲醇水溶液稀释成多个曲司氯铵工作溶液；内标储备液用体积比为1:1的甲醇水溶液稀释成浓度为10～20ng·mL‑1的内标工作溶液；(2)待测血浆样品前处理过程；(3)标准曲线的制作：以曲司氯铵和曲司氯铵‑d8的色谱峰面积比为纵坐标，以曲司氯铵的血药浓度与曲司氯铵‑d8的血药浓度的比值为横坐标，采用加权最小二乘法进行线性回归制作标准曲线，得回归方程Y＝a+bX；(4)根据回归方程计算待测血浆样品中的曲司氯铵的血药浓度。本发明采用液相色谱‑质谱/质谱法进行测定，灵敏度高。 | ||
| 搜索关键词： | 曲司氯铵 血药 甲醇水溶液 标准曲线 定量检测 工作溶液 回归方程 血浆样品 储备液 体积比 内标 稀释 血浆 标准工作溶液 检测技术领域 色谱峰面积比 最小二乘法 质谱/质谱 线性回归 液相色谱 灵敏度 前处理 氯铵 加权 配制 制作 | ||
【主权项】：
1.一种血浆中曲司氯铵的定量检测方法，其特征在于：包括如下步骤：(1)标准工作溶液的配制：称取曲司氯铵至玻璃瓶中，加入甲醇，配制成浓度为1～10mg·mL‑1的曲司氯铵储备液，分别将所述曲司氯铵储备液用体积比为1:1的甲醇水溶液稀释成多个曲司氯铵工作溶液，多个曲司氯铵工作溶液的浓度各不相同；称取曲司氯铵‑d8至玻璃瓶中，加入甲醇配制成浓度为1～10mg·mL‑1的内标储备液，用体积比为1:1的甲醇水溶液稀释成浓度为10～20ng·mL‑1的内标工作溶液；曲司氯铵工作溶液及内标工作溶液均在‑20℃下保存，备用；(2)待测血浆样品前处理过程：取待测血浆样品，向待测血浆样品中加入步骤(1)的内标工作溶液，然后加入乙腈沉淀剂，涡旋混合，离心取上清液并向上清液中加入纯化水，振荡混匀，进行液相色谱串联质谱/质谱测定，得待测血浆样品对应的曲司氯铵和曲司氯铵‑d8的色谱图；(3)标准曲线的制作：等量取步骤(1)的多个曲司氯铵工作溶液，分别加入到空白血浆样品中，然后加入步骤(1)的内标工作溶液，再加入乙腈沉淀剂，涡旋混匀，离心取上清液并向上清液中加入纯化水，振荡混匀，分别得多个曲司氯铵校正标准溶液，进行液相色谱串联质谱/质谱测定，得一系列具有不同已知浓度的曲司氯铵校正标准溶液的色谱图，以曲司氯铵和曲司氯铵‑d8的色谱峰面积比为纵坐标，以曲司氯铵的血药浓度与曲司氯铵‑d8的血药浓度的比值为横坐标，采用加权最小二乘法进行线性回归制作标准曲线，得回归方程Y＝a+bX；(4)待测血浆样品中的曲司氯铵的血药浓度的计算：根据回归方程计算待测血浆样品中的曲司氯铵的血药浓度。
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