[发明专利]小麦基因TaCPSF30编码序列的克隆及应用有效
申请号: | 201910189143.4 | 申请日: | 2019-03-13 |
公开(公告)号: | CN109694874B | 公开(公告)日: | 2022-09-23 |
发明(设计)人: | 王超;宋文路;王勇;李泽惠;杜昕昕;常彦红;倪飞 | 申请(专利权)人: | 济宁学院 |
主分类号: | C12N15/29 | 分类号: | C12N15/29;C12N15/10;C12N15/82;A01H5/00;A01H6/20;A01H6/46 |
代理公司: | 青岛发思特专利商标代理有限公司 37212 | 代理人: | 蔡绍强 |
地址: | 272001 *** | 国省代码: | 山东;37 |
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摘要: | 本发明小麦基因TaCPSF30编码序列的克隆及应用,属于植物分子生物学和基因克隆技术领域,首先获得小麦基因TaCPSF30的克隆,利用克隆得到的TaCPSF30基因的编码区序列(CDS)和Gateway兼容的35S启动子驱动带GFP标签的pMDC83载体,构建TaCPSF30过表达重组载体pMDC83‑TaCPSF30,然后以农杆菌介导浸花法转化拟南芥cpsf30突变体,并筛选纯合的转基因植株,构建成TaCPSF30转化拟南芥的异源互补株系。 | ||
搜索关键词: | 小麦 基因 tacpsf30 编码 序列 克隆 应用 | ||
【主权项】:
1.一种小麦基因TaCPSF30编码序列的克隆,其特征在于,所述小麦基因TaCPSF30编码序列的克隆是按照以下方法获得的:(1)提取小麦总RNA,反转录合成cDNA;(2)以cDNA为模板,设计特异引物,通过PCR扩增基因TaCPSF30编码区序列,其中,PCR扩增所用引物序列如下:TaCPSF30正向引物(F):5’‑CGGGGTACCATGGACGACGGCGACGGC‑3’;TaCPSF30反向引物(R):5’‑CCGCTCGAG TCGCTTCCTTGACCGCCT‑3’;(3)回收并纯化(2)的扩增产物中目的片段并进行测序,测序正确的即为小麦基因TaCPSF30编码序列的克隆。
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