[发明专利]一种基于外切酶Ⅲ辅助目标物循环与主客体识别的汞离子电传感分析检测方法

摘要

本发明公开了一种基于外切酶Ⅲ辅助目标物循环与主客体识别的汞离子电传感分析检测方法，包括以下步骤：将玻碳电极抛光打磨清洗；在玻碳电极表面电沉积纳米金制得纳米金修饰的电极；将氨基化的β‑环糊精修饰在纳米金颗粒上制得β‑环糊精修饰的电极，将Hg²⁺加入到DNA A1与DNA A2的混合溶液中形成双链溶液；将二茂铁标记的DNA A3加入上述双链溶液中孵育，形成T型DNA结构；将核酸外切酶III加入T型DNA结构中形成混合溶液；将混合溶液滴加到β‑环糊精修饰的电极表面；将修饰电极浸入到测试底液中检测其电化学性能，根据电化学信号实现Hg²⁺的定量测定；测试电化学生物传感器的线性和选择性。

主权项

1.一种基于外切酶Ⅲ辅助目标物循环与主客体识别的汞离子电传感分析检测方法，其特征在于，包括以下步骤：将预先准备好的玻碳电极进行抛光打磨，将打磨后的所述玻碳电极进行超声清洗，并置于室温下晾干备用；将晾干后的所述玻碳电极浸入到HAuCl₄溶液中并通电沉积，制得纳米金电极；将所述纳米金电极浸泡在预先准备好的氨基化的β‑环糊精中，制得β‑环糊精修饰的电极，并置于室温存放备用；将预先准备好的不同浓度的Hg²⁺加入到单链DNA A1与单链DNA A2的混合溶液中，形成具有T‑Hg²⁺‑T结构的部分互补配对DNA双链溶液；将预先通过二茂铁标记的单链DNA A3加入所述DNA双链溶液中孵育，形成T型结构DNA溶液；将预先准备好的核酸外切酶III加入所述T型结构DNA溶液中孵育，形成富含所述二茂铁的混合溶液；将所述混合溶液滴加到所述β‑环糊精修饰的电极表面，形成富集所述二茂铁的主客体复合物，制得修饰电极；将所述修饰电极浸入到预先准备好的PBS测试底液中并连接电化学工作站，采用循环伏安法CV对所述修饰电极进行电化学表征测定，制得电化学生物传感器；将所述电化学生物传感器浸入到PBS检测底液中并连接电化学工作站，采用差分脉冲伏安法DPV检测所述电化学生物传感器的电化学性能并测定所述PBS检测底液中Hg²⁺的浓度；采用差分脉冲伏安法DPV测试所述电化学生物传感器对Hg²⁺的特异选择性。