[发明专利]一种快速高效制备总神经节苷脂的方法

摘要

本发明涉及生物制药领域，具体说是一种快速高效制备总神经节苷脂的方法。该方法有效利用了反相层析介质的特点，相比大孔树脂在常压下操作，本发明的富集浓缩步骤可在中高压系统下进行，自动化程度更高，更快的处理浸提液，大大缩短的生产周期，提高了效率，而且产物的质量和产量都得到提高，为后续的转化、分离工作奠定基础。

主权项

1.一种快速高效制备总神经节苷脂的方法，其特征在于包括以下步骤：步骤一，总神经节苷脂的提取a.取新鲜猪脑组织，或冷冻猪脑解冻后匀浆，按照猪脑和提取液的质量比1:（5~9）混合，搅拌1‑2小时，静置后抽滤取清液；b.向a取得的清液中加入0.3‑0.4倍清液体积的纯水，搅拌0.5h以上，静置过夜，分层后收集上层清液；c.向b收集的清液中加入0.3‑0.4%氢氧化钠固体，控制温度50‑60℃进行消化1.5‑2h，得到总神经节苷脂浸提液；步骤二，总神经节苷脂的富集浓缩a.对步骤一中得到的总神经节苷脂浸提液进行减压蒸馏，准备进行反相层析吸附；b.反相层析介质装填于动态轴向压缩柱中，以20‑25%甲醇水溶液平衡动态轴向压缩柱，将a中浓缩后的浸提液以10‑12BV/h流速上样至动态轴向压缩柱中，上样体积为70‑90BV；c.上样完成后，继续用20‑25%甲醇水溶液冲洗动态轴向压缩柱3‑5BV，流速5‑6BV/h；d.洗脱：用75‑80%甲醇水溶液以2‑3BV/h流速洗脱动态轴向压缩柱，收集洗脱液；e.再生：用100%甲醇溶液以3‑5BV/h流速清洗动态轴向压缩柱；步骤三，将步骤二d中收集的洗脱液经40℃水浴减压浓缩，抽滤，干燥，既得总神经节苷脂。