[发明专利]一种制备纤维细胞作为细胞培养基的方法和用途在审
| 申请号： | 201910206565.8 | 申请日： | 2019-03-19 |
| 公开（公告）号： | CN110373375A | 公开（公告）日： | 2019-10-25 |
| 发明（设计）人： | 曹彤;哈里什·汉德拉尔;韦俊;曹哲厚;吴立前;维克拉姆·帕莱德 | 申请（专利权）人： | 杭州原生生物科技有限公司 |
| 主分类号： | C12N5/071 | 分类号： | C12N5/071;C12N5/0735;C12N5/0775 |
| 代理公司： | 杭州天昊专利代理事务所(特殊普通合伙) 33283 | 代理人： | 向庆宁 |
| 地址： | 311200 浙江省杭州市*** | 国省代码： | 浙江;33 |
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| 摘要： | 本发明提供一种制备纤维细胞作为细胞培养基的方法，该方法包括以下步骤：步骤1、提供胚胎干细胞悬浮液，培养为拟胚体(EB)并继续培养；步骤2、培养到第6天后的将形成的EB接种到6孔板中，使用诱导培养基进行5天时间的培养，所述的诱导培养基的成分包括：DMEM+10％血小板裂解物(Platelet lysate)；步骤3、当进行步骤(2)中的5天培养后，EB周围会爬出梭形的细胞，将梭形细胞挑出放于一个新的6孔板中用诱导培养基培养；步骤4、当诱导培养的6孔板中的梭形细胞汇合度达到90％时，按1:3的比例传代，待细胞汇合度达到100％。采用这样的方法培养的纤维细胞可以培养胚胎细胞而且适应范围广，避免了异源新问题。 | ||
| 搜索关键词： | 诱导培养基 纤维细胞 细胞培养基 梭形细胞 制备 传代 血小板裂解物 胚胎干细胞 胚胎细胞 细胞汇合 诱导培养 拟胚体 新问题 悬浮液 梭形 异源 汇合 接种 细胞 | ||
【主权项】：
1.一种制备纤维细胞作为细胞培养基的方法，该方法包括以下步骤：步骤1、提供胚胎干细胞悬浮液，培养为拟胚体(EB)并继续培养；步骤2、培养到第6天后的将形成的EB接种到6孔板中，使用诱导培养基进行5天时间的培养，所述的诱导培养基的成分包括：DMEM+10％血小板裂解物(Platelet lysate)；步骤3、当进行步骤(2)中的5天培养后，EB周围会爬出梭形的细胞，将梭形细胞挑出放于一个新的6孔板中用诱导培养基培养；步骤4、当诱导培养的6孔板中的梭形细胞汇合度达到90％时，按1:3的比例传代，待细胞汇合度达到100％。
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