[发明专利]一种骨髓来源的破骨细胞培养方法在审
| 申请号： | 201910257672.3 | 申请日： | 2019-04-01 |
| 公开（公告）号： | CN109810941A | 公开（公告）日： | 2019-05-28 |
| 发明（设计）人： | 李伟东;陆金兰;谢辉;吴丽;夏晨洁;周雅倩 | 申请（专利权）人： | 南京中医药大学 |
| 主分类号： | C12N5/077 | 分类号： | C12N5/077;A61K35/32;A61P19/10 |
| 代理公司： | 北京精金石知识产权代理有限公司 11470 | 代理人： | 强红刚 |
| 地址： | 210023 江苏省南*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种骨髓来源的破骨细胞培养方法，属于细胞培养技术领域。该方法是将已提取的骨髓用分离液处理后获得单核细胞，清洗后将所得的单核细胞加完全培养基和巨噬细胞集落刺激因子(M‑CSF)，接种于96孔板中，于第二天加含有RANKL和M‑CSF培养基培养。所用完全培养基，是在MEM Alpha basic培养基中添加胎牛血清和双抗制成的。其特征在于培养时间缩短，培养成本降低，使骨髓分离得到的可以分化为破骨细胞的单核细胞(破骨细胞前体细胞)纯度更大，培养得到的破骨细胞有相当甚至更好的效果，且破骨细胞在酶活性和数目来看具有更宽的范围，为筛选药物提供了一个更为精细、快速、便捷的培养方法。 | ||
| 搜索关键词： | 破骨细胞 单核细胞 完全培养基 骨髓来源 骨髓 巨噬细胞集落刺激因子 破骨细胞前体细胞 细胞培养技术 分离液处理 培养基培养 筛选药物 时间缩短 胎牛血清 培养基 酶活性 双抗 接种 清洗 精细 分化 | ||
【主权项】：
1.一种骨髓来源的破骨细胞培养方法，其特征在于，将已提取的骨髓用分离液处理后获得单核细胞，清洗后将所得的单核细胞加完全培养基和巨噬细胞集落刺激因子(M‑CSF)，接种于96孔板中，于第二天加含有RANKL和M‑CSF培养基培养，所用完全培养基，是在MEM Alpha basic培养基中添加15％胎牛血清FBS和1％分离液双抗溶液制成的。
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