[发明专利]用于辅助重组狂犬病毒在神经细胞高效逆向跨单级突触的rAAV病毒的包装方法及其应用有效
申请号: | 201910259248.2 | 申请日: | 2019-03-29 |
公开(公告)号: | CN110004118B | 公开(公告)日: | 2023-03-28 |
发明(设计)人: | 靳森;孙佩;徐富强;张玉慧;陶斯珏 | 申请(专利权)人: | 中国科学院武汉物理与数学研究所 |
主分类号: | C12N7/01 | 分类号: | C12N7/01;A01K67/027 |
代理公司: | 武汉宇晨专利事务所(普通合伙) 42001 | 代理人: | 江丽丽;王敏锋 |
地址: | 430071 湖*** | 国省代码: | 湖北;42 |
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摘要: | 本发明公开了一种用于辅助重组狂犬病毒在神经细胞高效逆向跨单级突触的重组腺相关病毒的包装方法及应用。通过将共携带荧光蛋白基因和TVA受体基因的表达质粒以及携带狂犬病毒膜蛋白(G蛋白)基因的表达质粒预混合成表达质粒混合物,然后与重组腺相关病毒辅助包装质粒共转染包装细胞后,经过纯化获得稳定性良好的单一重组腺相关病毒集合。相比于不同表达质粒分别单独包装成重组腺相关病毒后混合感染的方法,通过本发明可以明显降低不同重组腺相关病毒混合共感染所造成的排斥问题,获得的新型重组腺相关病毒可辅助重组狂犬病毒更高效地标记出大脑神经细胞在全脑的单级输入网络,即可以获得大脑特定脑区神经细胞更完整的全脑单级输入网络。 | ||
搜索关键词: | 用于 辅助 重组 狂犬病毒 神经细胞 高效 逆向 跨单级 突触 raav 病毒 包装 方法 及其 | ||
【主权项】:
1.用于辅助重组狂犬病毒在神经细胞高效逆向跨单级突触标记的rAAV病毒的包装方法,其特征在于,将共表达荧光蛋白基因和TVA受体基因的辅助病毒表达质粒以及表达重组狂犬病毒G蛋白基因的辅助病毒表达质粒预先混合成核心表达质粒混合物,然后与rAAV病毒辅助包装质粒共同转染包装细胞,进一步纯化获得单一rAAV病毒集合。
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