[发明专利]一种利用基因工程菌制备利巴韦林的方法有效
| 申请号： | 201910263616.0 | 申请日： | 2019-04-01 |
| 公开（公告）号： | CN109943583B | 公开（公告）日： | 2023-03-03 |
| 发明（设计）人： | 高淑红;戴芳萍;邱蔚然;卢姗;李旭;邱志云;周洁;黄佳雯 | 申请（专利权）人： | 南通秋之友生物科技有限公司;华东理工大学 |
| 主分类号： | C12N15/70 | 分类号： | C12N15/70;C12N15/54;C12P19/38 |
| 代理公司： | 长沙星耀专利事务所(普通合伙) 43205 | 代理人： | 舒欣 |
| 地址： | 226236 江苏*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种利用基因工程菌制备利巴韦林的方法，属于基因工程技术领域。具体地，包括合成具有SEQ ID NO:1所示的核苷酸序列的pun基因片段；构建重组质粒pET20b‑BA‑pun，并进而构建基因工程菌BL21/pET20b‑BA‑pun，诱导该基因工程菌即可得到合成利巴韦林的关键酶，即嘌呤核苷磷酸化酶。利用基因工程菌合成利巴韦林，转化率高、成本低、绿色环保，在工业生产中具有重要的意义。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 利用 基因工程 制备 利巴韦林 方法 | ||
【主权项】：
1.一种利用基因工程菌制备利巴韦林的方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)制备能够表达具有SEQ ID NO:1所示的核苷酸序列的pun基因片段的基因工程菌；(2)诱导表达步骤1)所述的基因工程菌，将诱导培养得到的菌液经离心和洗涤后，收集细胞菌体；(3)以磷酸钾缓冲液为反应溶剂，以鸟苷和1,2,4‑三氮唑‑3‑甲酰胺为反应底物，在反应底物中加入上述细胞菌体作为酶源并混合均匀；(4)将混合均匀后的反应体系放入摇床进行酶转化；(5)反应结束后将反应体系置于冰水浴中冷却1，12000r/min离心5min得上清液，即为包括利巴韦林的溶液。
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