[发明专利]一种高产热噬地芽胞杆菌芽胞的培养方法

摘要

本发明涉及热噬地芽胞杆菌芽胞培养领域。且公开了一种高产热噬地芽胞杆菌芽胞的培养方法。该高产热噬地芽胞杆菌芽胞的培养方法，包括以下步骤：S1、高温杀菌：取多个培养皿，用清水对培养皿进行冲洗，冲洗完成后，将培养皿放置在压力蒸汽灭菌器内，对培养皿进行高温灭菌，灭菌温度为115℃‑135℃，灭菌时间15min‑40min，灭菌完成后，取出培养皿备用。该高产热噬地芽胞杆菌芽胞的培养方法，以R2A培养基为基础培养基，并向R2A培养基内添加锰离子和硫酸镁的培养方法，显著提高了芽胞生成数量，从而节约了时间和经济成本，使用该方法培养的芽胞浓度可以达到1.55×10⁸cfu/mL，可以有效提高热噬地芽胞杆菌芽胞的收集速率，实现更高效的生产。

主权项

1.一种高产热噬地芽胞杆菌芽胞的培养方法，其特征在于：包括以下步骤：S1、高温杀菌：取多个培养皿，用清水对培养皿进行冲洗，冲洗完成后，将培养皿放置在压力蒸汽灭菌器内，对培养皿进行高温灭菌，灭菌温度为115℃‑135℃，灭菌时间15min‑40min，灭菌完成后，取出培养皿备用;S2、制备混合培养基，向培养瓶中加入10‑20份R2A培养基，然后分别向R2A培养基内添加3‑5份硫酸锰和3‑5份硫酸镁，通过搅拌棒进行搅拌，使R2A培养基、硫酸锰和硫酸镁充分混合，搅拌时间为5min‑10min；将培养基放置在压力蒸汽灭菌器内，对培养基进行高温灭菌，灭菌温度为115℃‑135℃，灭菌时间15min‑40min，灭菌完成后，取出培养基，待其冷却至45℃时，倾注平板备用;S3、培养：向装有混合培养基的培养皿中加入10‑15份芽胞，培养温度50℃‑65℃，培养时间7‑16天;S4、离心收集：培养完成后，使用无菌棉拭子刮下菌苔，将其悬浮在无菌生理盐水中，将制备的悬液放置在离心机内，通过离心机使培养完成后的芽胞聚集在一起，离心收集的转速为3000‑5000r/min，离心收集时间为10min‑30min然后将芽胞收集起来；丢弃上清液后，使用无菌生理盐水将其悬浮起来，再次离心，然后丢弃上清液;S5、杀灭残余菌体：使用超纯水将离心收集的芽胞悬浮起来，在80℃‑96℃水浴中，高温震荡处理5min‑15min；将处理后的悬液进行离心，收集芽胞后，使用无菌生理盐水重悬，制成热噬地芽胞杆菌芽胞悬液。