[发明专利]一种用于猪抗病育种的遗传分子标记方法和应用在审
申请号: | 201910286939.1 | 申请日: | 2019-04-11 |
公开(公告)号: | CN109971840A | 公开(公告)日: | 2019-07-05 |
发明(设计)人: | 曹越;郜重丞;包文斌;王海飞;吴正常 | 申请(专利权)人: | 扬州大学 |
主分类号: | C12Q1/6858 | 分类号: | C12Q1/6858;C12Q1/6888 |
代理公司: | 南京钟山专利代理有限公司 32252 | 代理人: | 戴朝荣 |
地址: | 225009 *** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | 本发明公开了一种用于猪抗病育种的遗传分子标记方法和应用,遗传分子标记方法包括以下步骤:包括以下步骤:步骤一:猪TLR5基因变异位点的筛选和确定;步骤二:扩增包含所确定变异位点的序列;步骤三:对步骤二的扩增产物进行SSCP分析,全面检测猪核心群基因型;步骤四:对个体基因型与代表一般抗病力的重要细胞因子之间进行关联分析;最终选择扩增产物PCR‑SSCP带型4条带中出现3条带的样本为抗病育种中的有利个体。本发明提供的用于猪抗病育种的遗传分子标记方法,准确度高,可大批量检测,为提高仔猪的免疫应答能力和一般抗病力提供了一种有效的分子标记育种手段,将本遗传分子标记用于抗病育种,还可以加快育种进程。 | ||
搜索关键词: | 抗病育种 遗传分子 扩增产物 抗病力 条带 分子标记育种 免疫应答能力 个体基因型 准确度 变异位点 关联分析 基因变异 全面检测 育种进程 重要细胞 核心群 基因型 仔猪 带型 扩增 位点 样本 应用 筛选 检测 | ||
【主权项】:
1.一种用于猪抗病育种的遗传分子标记方法,其特征在于,包括以下步骤:步骤一:猪TLR5基因变异位点的筛选和确定PCR扩增TLR5基因目的片段:对所有待测猪样本提取基因组DNA,并以基因组混合DNA为扩增模板,设计7对特异性引物对:F1/R1、F2/R2、F3/R3、F4/R4、F5/R5、F6/R6、F7/R7,进行PCR扩增;TLR5基因变异位点的确定:将上述PCR扩增序列进行DNA测序,测序结果经Blast比对,发现仅在TLR5基因扩增片段的内含子2152bp处存在1个SNP位点;步骤二:扩增包含所确定变异位点的序列对每个待测猪样本提取基因组DNA,作为扩增模板,以引物F7:5'‑GGTTACCGACATGGCTAG‑3和引物R7:5'‑TCAGATGAAGCAGGAGCA‑3'为上下游引物,进行PCR扩增,扩增片段包含内含子174bp序列的PCR引物,目的片段长度174bp;步骤三:对步骤二的扩增产物进行SSCP分析,全面检测猪核心群基因型;步骤四:对个体基因型与代表一般抗病力的重要细胞因子之间进行关联分析及抗性标记的确定。
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