[发明专利]用于禽畜的丁酸梭菌复合菌液的制备方法

摘要

本发明公开了一种用于禽畜的丁酸梭菌复合菌液的制备方法，包括如下制备步骤：A、制作复合菌群原料；B、制作一级液体菌种：（1）配置培养液；（2）将配置好的培养液装入三角瓶中，封口、灭菌后冷却至25℃以下，接入步骤A所得的母种菌丝块，每100ml培养液中接入1‑2块长宽各为2mm的母种菌丝块；同时添加步骤A所得丁酸梭菌活化扩繁液10‑50ml；混匀菌种，然后培养1‑2.5天，得一级液体菌种；C、制作二级液体菌种，得到复合液体益生菌剂。本发明以研究课题成果为依据，所制备的复合菌液当中含有特定的益生菌群，通过在禽畜身体上喷洒复合液体益生菌剂，即可进行禽畜自身卫生环境的改善和疾病的防治。

主权项

1.用于禽畜的丁酸梭菌复合菌液的制备方法，其特征在于：该方法包括如下制备步骤：A、制作复合菌群原料：（1）取丁酸梭菌原液在碳源充足的温暖溶液中充分扩繁活化，备用；（2）同时进行里氏木霉菌的母种培养，将里氏木霉菌丝块接入到PDA培养基上，25℃黑暗培养直至菌丝长满斜面，备用；B、制作一级液体菌种：（1）配置培养液；所述培养液包括如下重量份的组分：马铃薯10‑15，红糖1‑1.5，葡萄糖1‑1.5，麦麸3‑4，蛋白胨1‑2，磷酸二氢钾1‑2，硫酸镁1‑1.5，琼脂1，清水75‑80，pH值自然；再向培养液中加入维生素B1；（2）将配置好的培养液装入三角瓶中，封口、灭菌后冷却至25℃以下，接入步骤A所得的母种菌丝块，每100ml培养液中接入1‑2块长宽各为2mm的母种菌丝块；同时添加步骤A所得丁酸梭菌活化扩繁液10‑50ml；混匀菌种，然后培养1‑2.5天，得一级液体菌种；C、制作二级液体菌种：（1）将9‑11重量份的土豆加90‑100重量份的水煮至酥而不烂后加入3.4‑3.8重量份的大片麦麸，用6‑8层纱布过滤后，向滤液中加入2.5‑3重量份的辅料和0.025‑0.03体积份的消泡剂，作为培养料；（2）将350‑370体积份的培养料注入培养罐内，124℃灭菌35分钟后，降温至30℃以下；将0.8‑1.2体积份的一级液体菌种在无菌条件下接入到培养罐内；培养72‑96小时，培养温度25℃，空气流量1.2m³/h以上；培养结束后得二级液体菌种，即为复合液体益生菌剂；所述重量份的单位为g或kg，对应的体积份单位为mL或L。