[发明专利]一种变形链球菌生物膜形成量的检测方法及应用有效
| 申请号： | 201910309315.7 | 申请日： | 2019-04-17 |
| 公开（公告）号： | CN109852570B | 公开（公告）日： | 2022-04-29 |
| 发明（设计）人： | 韩瑨;吴正钧;刘振民;吴燕婷;王晓花 | 申请（专利权）人： | 光明乳业股份有限公司 |
| 主分类号： | C12N1/20 | 分类号： | C12N1/20;C12Q1/04;C12R1/46 |
| 代理公司： | 北京东正专利代理事务所(普通合伙) 11312 | 代理人： | 蔡仲德 |
| 地址： | 201103 *** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： |
本发明公开了一种变形链球菌生物膜形成量的检测方法，包括以下步骤：(11)将磁力搅拌子A浸没于唾液中进行孵育；(12)吸起磁力搅拌子A，淋洗后取下，置于24孔板培养孔中；(13)加入BHI液体培养基、变形链球菌菌悬液、待测样品溶液，再次孵育；(14)吸起磁力搅拌子A，淋洗后取下，置于24孔板的培养孔中自然风干；(21)加入结晶紫溶液染色，吸起磁力搅拌子A，淋洗后取下，置于24孔板的培养孔中自然风干；(22)加入无水乙醇脱色后转移至96孔板内，用酶标仪测定OD |
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| 搜索关键词： | 一种 变形 链球菌 生物膜 形成 检测 方法 应用 | ||
【主权项】：
1.一种变形链球菌生物膜形成量的检测方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)变形链球菌生物膜的形成：(11)将磁力搅拌子A浸没于唾液中进行孵育；(12)用磁力搅拌子B吸起磁力搅拌子A，以PBS缓冲液淋洗后，取下磁力搅拌子A，置于24孔板的培养孔中；(13)向培养孔中加入BHI液体培养基、变形链球菌菌悬液、待测样品溶液，再次孵育；(14)用磁力搅拌子B吸起磁力搅拌子A，以PBS缓冲液淋洗后，取下磁力搅拌子A，置于24孔板的培养孔中，自然风干；(2)变形链球菌生物膜的检测：(21)向培养孔中加入结晶紫溶液染色完全后，用磁力搅拌子B吸起磁力搅拌子A，以PBS缓冲液淋洗去除多余的染色液，取下磁力搅拌子A，置于24孔板的培养孔中，自然风干；(22)向培养孔中加入无水乙醇脱色，取200～300μL转移至96孔板内，用酶标仪测定OD600nm，即为量化后的变形链球菌生物膜形成量。
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