[发明专利]一种基于双酶-无机纳米花复合材料的酒精定量分析方法

摘要

本发明公开了一种基于双酶‑无机纳米花复合材料的酒精定量分析方法。所述方法包括将醇氧化酶(AOX)、辣根过氧化物酶(HRP)、CaCl2溶液加入磷酸盐缓冲溶液中，室温静置反应，得到双酶‑无机纳米花复合材料(AOHNF)。反应条件简单，得到的材料酶活性和稳定性均显著增强。再利用AOX催化氧化溶液中酒精发生反应生成H2O2，HRP催化TMB与H2O2反应使溶液呈现蓝色，测定吸收波长在650nm处的吸光度，从而得出溶液中酒精浓度的大小。分析方法操作简单，检测结果灵敏度高。本发明所述的基于双酶‑无机纳米花复合材料的酒精定量分析方法具有操作简单、灵敏度高、稳定性好等特点，发展前景良好。

主权项

1.一种基于双酶‑无机纳米花复合材料的酒精定量分析方法，其特征在于，包括以下步骤：步骤1)先将醇氧化酶溶液、辣根过氧化物酶溶液加入磷酸盐缓冲溶液中，然后加入CaCl₂溶液，混合，静置，反应结束后离心，去除上清液，再加入磷酸盐缓冲溶液，混合均匀，即制得双酶‑无机纳米花复合材料；步骤2)将步骤1)制得的双酶‑无机纳米花复合材料与一系列不同酒精浓度的样品溶液混合，加入显色剂，进行紫外‑可见分光光谱扫描，记录吸光度值，以酒精浓度为横坐标，吸光度值为纵坐标，得到标准曲线；步骤3)根据标准曲线法，即可得到所测样品的酒精浓度。