[发明专利]一种基于蛋白质薄膜隔离固定的生物大分子微反应器在审
| 申请号： | 201910334485.0 | 申请日： | 2019-04-24 |
| 公开（公告）号： | CN110028586A | 公开（公告）日： | 2019-07-19 |
| 发明（设计）人： | 杨鹏;刘瑞瑞 | 申请（专利权）人： | 陕西师范大学 |
| 主分类号： | C07K17/14 | 分类号： | C07K17/14;C12N11/14;C12N15/10;C07K16/00 |
| 代理公司： | 西安永生专利代理有限责任公司 61201 | 代理人： | 高雪霞 |
| 地址： | 710062 *** | 国省代码： | 陕西;61 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种基于蛋白质薄膜隔离固定生物大分子的微反应器，首先将需要隔离的功能性生物大分子通过共沉淀的方法负载在CaCO3颗粒内部与表面，或者通过直接吸附的方法负载在CaCO3颗粒表面，然后将蛋白质薄膜包裹在CaCO3颗粒表面，最后通过EDTA或酸性溶液刻蚀去除内部CaCO3模板，实现功能性生物大分子在微观层面的隔离固定，进而互不影响生物大分子生理功能的发挥。本发明微反应器的制备方法简单、成本低廉、绿色环保，可实现对各种功能性生物大分子的微观隔离，包括各种蛋白质、酶、抗体、脂质、多肽、DNA、RNA等，具有广泛的普适性，易实现大规模工业应用，并且对生物大分子进行隔离的微反应器的大小、形状可通过模板进行调控。 | ||
| 搜索关键词： | 微反应器 隔离 蛋白质薄膜 功能性生物 生物大分子 颗粒表面 固定生物大分子 工业应用 颗粒内部 绿色环保 生理功能 酸性溶液 微观层面 影响生物 共沉淀 固定的 普适性 多肽 抗体 刻蚀 吸附 脂质 去除 制备 蛋白质 微观 调控 | ||
【主权项】：
1.一种基于蛋白质薄膜隔离固定的生物大分子微反应器，其特征在于该微反应器由下述方法制备得到：(1)将Na2CO3和CaCl2加入水中，并加入生物大分子，搅拌15～60秒，静置2～10分钟后，通过去离子水离心清洗，得到负载有生物大分子的CaCO3颗粒；或者将CaCO3颗粒分散于生物大分子水溶液中，室温下培育12～24小时，得到负载有生物大分子的CaCO3颗粒；(2)将1～200mmol/L三(2‑羧乙基)膦的磷酸盐缓冲液用NaOH调节至pH值为6.5～7.5，然后将其与1～50mg/mL蛋白质的磷酸盐缓冲液混合均匀，并加入上述制备好的负载有生物大分子的CaCO3颗粒，室温下培育30～60分钟，离心清洗去除反应杂质，得到蛋白质薄膜包裹的负载有生物大分子的CaCO3颗粒；(3)将蛋白质薄膜包裹的负载有生物大分子的CaCO3颗粒浸没在0.001～0.1mol/L的EDTA溶液或者pH为1～6的酸性溶液中，刻蚀掉CaCO3，得到蛋白质薄膜隔离固定的生物大分子微反应器。
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