[发明专利]一种片状磷酸钙疫苗佐剂及其制备方法

摘要

一种片状磷酸钙疫苗佐剂及其制备方法，制备方法为：（1）将一定量的壳聚糖溶于水中，用盐酸调节PH至壳聚糖完全溶解，将一定量的3，4‑二羟基苯基丙酸和碳二亚胺（EDC）分别溶于乙醇和水中，并将两者混合均匀，在快速搅拌下加入壳聚糖溶液中，用氢氧化钠调其pH为5.5左右，反应一定时间，透析，冻干，即得儿茶酚修饰的壳聚糖（CSC）。（2）将蛋白质模拟抗原加入到CSC水溶液中，搅拌至其混合均匀；随后，加入磷酸盐缓冲溶液，搅拌一段时间，之后加入CaCl2水溶液中，搅拌相同的时间，离心，水洗即得到片状磷酸钙疫苗佐剂。本发明保证了蛋白质疫苗的活性及佐剂使用的安全性；制备工艺简便，原料廉价，产物快速易得。

主权项

1.一种片状磷酸钙疫苗佐剂的制备方法，其特征在于包括如下步骤：（1）将壳聚糖分散于水中，用盐酸调节pH至壳聚糖完全溶解，使得最终的质量百分浓度为0.5%‑4%，将浓度为10‑40 mg mL^‑1的3，4‑二羟基苯基丙酸的乙醇溶液和浓度为10‑40 mg mL^‑1的1‑(3‑二甲氨基丙基)‑3‑乙基碳二亚胺盐酸盐（EDC）水溶液按:0.5:1‑4:1比例混合均匀，在快速搅拌下加入壳聚糖溶液中，用氢氧化钠调其pH为5.0‑6.0，反应2‑12 h，在pH 5.0‑7.0的盐酸水溶液中透析1‑3天后，去离子水透析2‑10 h，冻干，即得儿茶酚改性壳聚糖（CSC）；（2）将0.5‑10 ml蛋白质模拟抗原加入到等体积的CSC的水溶液中，搅拌至混合均匀；（3）将0.4‑8 ml磷酸盐缓冲溶液（PBS）加入上述（2）中，400‑800r/min搅拌5 min‑20 min，之后加入2‑30 ml CaCl2水溶液，搅拌5 min‑20 min，离心，用去离子水洗涤2‑4次，得到片状磷酸钙疫苗佐剂。